文献类型: 中文期刊
第一作者: 亓英芳
作者: 亓英芳;黄瑛;杜艳芬;刘慧芳;赫明雷;司微;倪洪波;王春来;刘思国
作者机构:
关键词: 牛分枝杆菌;外膜蛋白ompA;原核表达;纯化;Westernblot
期刊名称: 中国动物传染病学报
ISSN: 1674-6422
年卷期: 2009 年 17 卷 04 期
页码: 43-46
摘要: 为验证牛分枝杆菌外膜蛋白A是否具有免疫活性,以牛分枝杆菌ValleeⅢ株基因组DNA为模板扩增牛分枝杆菌外膜蛋白基因ompA,采用DNA重组技术将此基因片段连于表达载体pGEX6p-1,构建重组质粒pGEX6p-1-ompA,并将其转化到大肠杆菌中BL21(DE3)中,IPTG诱导(终浓度为0.1mmol/L),表达产物进行SDS-PAGE分析。用glutathione sepharose4B纯化蛋白和Western blot分析该蛋白的免疫学活性。结果表明:pGEX6p-1-ompA以可溶形式表达,蛋白分子量大小为60kDa,与预计大小相符,纯化的蛋白具有良好的免疫学活性。
分类号: S852.5
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