瓜类褪绿黄化病毒p22基因在大肠杆菌中的表达及抗血清的制备

文献类型： 中文期刊

第一作者： 施艳

作者： 施艳;王振跃;袁媛;刘珊珊;孙虎;古勤生

作者机构：

关键词： 甜瓜;瓜类褪绿黄化病毒;P22;原核表达;抗血清

期刊名称： 园艺学报

ISSN： 0513-353X

年卷期： 2013 年 40 卷 04 期

页码： 762-766

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 以被瓜类褪绿黄化病毒(Cucurbit chlorotic yellows virus,CCYV)侵染的甜瓜叶片为供试材料,采用RT-PCR方法克隆其P22蛋白基因,并将其连接到原核表达载体pGex-4T-3上,PCR验证及克隆测序确定开放阅读框的正确性。将重组载体pGexp22转化大肠杆菌BL21菌株,诱导表达,SDS-PAGE分析表明,经IPTG诱导,p22基因在大肠杆菌BL21中得到了高效表达。以表达的蛋白作为抗原,免疫家兔,制备了CCYV P22的特异性抗血清。ACP-ELISA检测结果表明,血清效价高达1.28×105。Western blot检测甜瓜叶片,结果表明抗血清能够特异性地检测CCYV侵染的甜瓜叶片中的CCYV P22蛋白。

分类号： S436.5`S436.42

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