梅花鹿Thymosin beta 10基因的原核表达、活性鉴定和多克隆抗体制备

文献类型： 中文期刊

第一作者： 褚文辉

作者： 褚文辉;张伟;赵海平;王大涛;李春义

作者机构：

关键词： 梅花鹿;Thymosin beta 10;原核表达;鹿茸;多克隆抗体

期刊名称： 中国农业大学学报

ISSN： 1007-4333

年卷期： 2018 年 23 卷 11 期

页码： 72-79

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 为研究梅花鹿Thymosin beta 10基因(Tβ10)在鹿茸快速生长过程中的作用,利用Gateway技术构建梅花鹿Tβ10基因的原核表达载体—pDEST17-Tβ10并诱导表达,对融合蛋白进行功能检测及多克隆抗体制备。结果表明:1)获得了190bp Tβ10基因开放阅读框序列,并获得重组表达载体pDEST17-Tβ10。2)pDEST17-Tβ10在宿主BL21-SI中诱导表达条件为0.3mol/L NaCL诱导2h,获得产物的最终浓度为0.50mg/mL。3)制备的Tβ10蛋白多克隆抗体血清效价在105之上,该抗体可以特异性结合天然和原核表达的Tβ10蛋白。4)离体检测发现,Tβ10融合蛋白一方面可以促进人脐静脉内皮细胞增殖,另一方面可以抑制鹿茸前成软骨区细胞的增殖。综上所述,本研究获得了具有生物活性的Tβ10融合蛋白,并制备了高度特异性的梅花鹿Tβ10蛋白多克隆抗体,为深入研究Tβ10基因的生物学功能奠定了基础。

分类号： S825

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