哲罗鲑胰岛素样生长因子-Ⅰ的原核表达及活性鉴定

文献类型： 中文期刊

第一作者： 王晓玉

作者： 王晓玉;徐黎明;刘淼;赵景壮;卢彤岩;曹永生;尹家胜

作者机构：

关键词： 哲罗鲑;胰岛素样生长因子-Ⅰ;原核表达;生物活性

期刊名称： 水产学报

ISSN： 1000-0615

年卷期： 2016 年 40 卷 011 期

页码： 1657-1663

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 为进一步了解哲罗鲑IGF-Ⅰ,实验采用逆转录聚合酶链武反应(RT-PCR)方法,从哲罗鲑肝脏的总RNA中扩增出胰岛素样生长因子-Ⅰ(IGF-Ⅰ)的cDNA开放阅读框(open reading frame,ORF)序列.利用原核表达载体pS构建重组表达质粒(IGF-Ⅰ/pS),并将其转化到宿主大肠杆菌Rosetta后经IPTG诱导获得重组哲罗鲑IGF-I蛋白.经SDS-PAGE电泳检测,在35~50ku有条带与预期相符,且重组蛋白以包涵体的形式存在.包涵体经变性/复性实验后,获得纯化的IGF-Ⅰ融合蛋白.ELISA鉴定结果显示,目的蛋白能特异性识别抗鱼类IGF-Ⅰ抗体,表明获得了具有免疫活性的哲罗鲑IGF-Ⅰ蛋白.细胞增殖实验(MTT法)结果显示,重组IGF-Ⅰ蛋白对大麻哈鱼胚胎细胞(CHSE-214)、鲤上皮细胞(EPC)及虹鳟性腺细胞(RTG-2)均有显著促增殖作用,表明获得的重组IGF-Ⅰ蛋白具有细胞水平的生物活性.本研究为深入了解IGF-Ⅰ在哲罗鲑生长发育中的调控机制及绿色高效促生长制剂的研发奠定基础.

分类号： Q785%S917.4

  • 相关文献

[1]哲罗鲑胰岛素样生长因子-I的原核表达及活性鉴定. 王晓玉,徐黎明,刘淼,赵景壮,卢彤岩. 2016

[2]草鱼胰岛素样生长因子-Ⅰ基因在大肠杆菌中的表达. 叶星,白俊杰,简清,李新辉,李英华,李凯彬,罗建仁. 2001

[3]水貂IGF-Ⅰ基因的克隆、序列分析及原核表达研究. 荣敏,杨福合,许尚忠,王桂武,邢秀梅,吴琼. 2009

[4]星突江鲽胰岛素样生长因子I的体外重组表达及生物活性分析. 徐永江,臧坤,柳学周,史宝,陈圣毅. 2015

[5]半滑舌鳎(Cynoglossus semilaevis Günther)IGF-Ⅱ的体外重组表达. 徐永江,柳学周,张凯,武宁宁,刘芝亮,李春广. 2015

[6]半滑舌鳎类胰岛素生长因子-Ⅰ的原核表达及活性分析. 刘芝亮,徐永江,柳学周,史宝,王妍妍. 2013

[7]半滑舌鳎食欲素B的体外重组制备与生物活性分析. 徐永江,李斌,柳学周,张凯,史宝,王滨,宋雪松. 2017

[8]牛干扰素-tau基因的原核表达及生物功能鉴定. 高方方,吴忠义,曾申明. 2008

[9]犬表皮细胞生长因子的原核表达和纯化及其活性鉴定. 王雪敏,杨传定,魏建超,史子学,邵东华. 2013

[10]半滑舌鳎两种leptin基因的体外重组表达和生物活性分析. 张雅星,王滨,柳学周,徐永江,史宝,姜燕,崔爱君,张正荣,孙冉冉. 2019

[11]C型口蹄疫结构蛋白VP3的原核表达及生物活性. 刘文倩,王猛,张奕强,刘永生,张杰. 2011

[12]星突江鲽胰岛素样生长因子II的原核表达与生物活性分析. 臧坤,徐永江,柳学周,史宝,王妍妍. 2015

[13]半滑舌鳎黑色素聚集激素重组制备与生物活性分析. 朱学武,徐永江,柳学周,史宝,王滨,李斌. 2016

[14]星突江鲽胰岛素样生长因子Ⅱ的原核表达与生物活性分析. 臧坤,徐永江,柳学周,史宝,王妍妍. 2015

[15]半滑舌鳎食欲素A体外重组表达及活性分析. 李斌,徐永江,柳学周,史宝,王滨,朱学武. 2016

[16]肠炎沙门菌鞭毛蛋白的原核表达纯化及其多克隆抗体的制备. 史冰田,王高玲,郭杰,司微,李涛. 2016

[17]人胰岛素样生长因子-Ⅰ基因农杆菌工程菌株的构建. 周鹏,王跃进,贺普超. 2001

[18]松辽黑猪IGF-Ⅰ基因外显子4多态性及与部分生产性能的关系. 肖书奇,张嘉保,李爽,赵志辉,任文陟,赵中利,张树敏,戴立胜,高妍,李毅. 2007

[19]玉米秸秆型日粮营养水平对肉牛肝脏IGF-Ⅰ及其受体基因表达的影响. 王蕾,梁晓斐,栾丽,高阳,杨连玉,秦贵信. 2016

[20]不同水平赖氨酸对绵羊胰岛素样生长因子-Ⅰ基因表达的影响. 程胜利,李建升,冯瑞林,裴杰,岳耀敬,郭宪,刘建斌,杨博辉,郭天芬. 2010

作者其他论文 更多>>

微信小程序