猫传染性腹膜炎病毒N蛋白表达及其多克隆抗体制备

文献类型: 中文期刊

第一作者: 刘福康

作者: 刘福康;袁莉刚;张达;汤傲星;刘光清;朱杰

作者机构:

关键词: 猫传染性腹膜炎病毒;猫冠状病毒;N蛋白;基因克隆;原核表达;多克隆抗体

期刊名称: 畜牧兽医学报

ISSN: 0366-6964

年卷期: 2024 年 55 卷 010 期

页码: 4773-4778

收录情况: 北大核心 ; CSCD

摘要: 本研究旨在体外原核表达猫传染性腹膜炎病毒(feline infectious peritonitis virus, FIPV)SH2021株核衣壳蛋白(nucleocapsid, N),制备兔源多克隆抗体。根据FIPV SH2021株N基因序列设计引物,构建pCold-I-N重组表达质粒。随后,将重组质粒转化至表达感受态细胞BL21(DE3),在终浓度为1.0 mmol·L-1的IPTG和16℃的诱导条件下进行表达。最后,利用His层析柱进行纯化,纯化后的重组蛋白免疫新西兰大白兔制备多克隆抗体。结果表明,纯化获得重组N蛋白大小约为45 ku,制备的N蛋白兔多克隆抗体效价可达1∶512 000,该抗体对N蛋白具有良好的反应原性。本研究成功所制备了FIPV N蛋白兔多克隆抗体,该抗体具有良好的反应原性和特异性,为FIPV抗原抗体检测以及研究N蛋白生物学功能研究提供重要工具。

分类号: S852.65

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