新城疫病毒ClassⅠ强毒株L基因的表达及单克隆抗体的制备

文献类型： 中文期刊

第一作者： 韦娜娜

作者： 韦娜娜;于洋;陈鸿军;仇旭升;于圣青

作者机构：

关键词： 新城疫病毒;原核表达;单克隆抗体;L蛋白;杂交瘤细胞

期刊名称： 中国兽医科学

ISSN： 1673-4696

年卷期： 2012 年 04 期

页码： 347-351

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 采用RT-PCR方法从新城疫病毒(NDV)ClassⅠ强毒株9a5b中扩增出了L基因C末端的基因片段,将其克隆到表达载体pGEX-6P-1中,测序验证后转化入表达宿主菌BL21进行IPTG诱导表达,表达的蛋白接种8周龄BALB/c小鼠,制备L蛋白的单克隆抗体,用间接免疫荧光试验(IFA)、酶联免疫吸附试验(ELISA)和Western-bolt方法共同检测所获得的抗体。结果显示,重组菌可表达出分子质量约为39ku的重组融合蛋白。SDS-PAGE分析显示,表达的蛋白以包涵体的形式存在于菌体中。多种方法筛选显示成功制备了4株单克隆抗体。免疫特异性鉴定结果表明,在所获得的单抗中,4株单抗均具有ELISA和IFA效价,且4株单抗与ClassⅠ毒株的反应均强于与ClassⅡ毒株的反应。

分类号： S852.659.5

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