猪弓形虫重组MIC3蛋白单克隆抗体的制备及其初步应用

文献类型: 中文期刊

第一作者: 白昀

作者: 白昀;王海燕;王占伟;纪燕;吴叙苏;刘冬霞;邵国青

作者机构:

关键词: 岗地弓形虫;MIC3蛋白;单克隆抗体;胶体金

期刊名称: 畜牧兽医学报

ISSN: 0366-6964

年卷期: 2013 年 44 卷 10 期

页码: 1622-1628

收录情况: 北大核心 ; CSCD

摘要: 为获得针对猪弓形虫MIC3蛋白的单克隆抗体,为进一步研制免疫金标试纸条提供材料,作者以纯化的重组MIC3蛋白免疫BALB/c小鼠,运用杂交瘤技术制备单克隆抗体(McAb)。经ELISA筛选阳性克隆和亚克隆建株,体内诱生腹水法制备McAb,测定其亚类、效价,进行Western blot分析,并利用胶体金颗粒标记的McAb制备免疫金标试纸条。成功制备了2株稳定分泌抗MIC3蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞株B7和D3,2株McAb的免疫球蛋白亚类均为IgG2a,其ELISA腹水效价分别为1∶64万和1∶192万,Western blot结果表明,2株McAbs腹水均能分别与纯化的重组MIC3蛋白和猪弓形虫全虫蛋白中大小为56和38ku左右的蛋白发生特异性反应;用纯化后McAb标记的胶体金颗粒制备的免疫金标试纸条可以检测到最低浓度为4×104 CFU·mL-1的弓形虫速殖子。本研究为猪弓形虫病的现场诊断提供了有效的方法,显示出很好的临床应用前景。

分类号: S858.28

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