猪圆环病毒Ⅱ型TaqMan荧光定量PCR检测方法的建立及应用

文献类型: 中文期刊

第一作者: 郝立沙

作者: 郝立沙;张璐;佟杰;于颖;杨莹莹;张武超;涂亚斌;蔡雪辉

作者机构:

关键词: 猪圆环病毒Ⅱ型(PCV-2);TaqMan荧光定量PCR;应用;探针;标准品;拷贝数

期刊名称: 黑龙江畜牧兽医

ISSN: 1004-7034

年卷期: 2015 年 11 期

页码: 168-171

收录情况: 北大核心

摘要: 为了快速准确检测猪圆环病毒Ⅱ型(PCV-2)并对病毒拷贝数进行定量,试验根据Gen Bank中PCV-2保守序列(登录号为FJ644559.1)设计1对特异性引物和Taq Man探针,制备标准品,建立PCV-2的荧光定量检测方法,并对临床样品进行检测。结果表明:该方法在1×101~1×108拷贝/μL的模板范围内具有良好的线性关系,相关系数可达0.999;敏感性是常规PCR方法的100倍;对猪细小病毒(PPV)、猪伪狂犬病病毒(PRV)、猪瘟病毒(CSFV)、猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)均为阴性,没有交叉反应;批内、批间重复试验变异系数均小于2.50%;在临床检测中,比常规PCR方法检测PCV-2的阳性检出率高出38%。说明试验成功建立了PCV-2 Taq Man荧光定量PCR检测方法,可用于临床检测PCV-2感染及对其拷贝数进行定量。

分类号: S852.65

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