同步检测动物源性成分的四重PCR的条件优化和检出限分析

文献类型： 中文期刊

第一作者： 王金斌

作者： 王金斌;李文;郭陈莉;白蓝;刘华;吴文惠;唐雪明

作者机构：

关键词： 动物源性成分;四重PCR;高通量分析;优化;检出限;食品安全

期刊名称： 上海农业学报

ISSN： 1000-3924

年卷期： 2018 年 03 期

页码： 37-44

收录情况： CSCD

摘要： 为建立肉制品中牛、羊、猪、鸡动物源性成分的快速高效多重PCR检测方法,利用4对牛、羊、猪和鸡源特异性PCR引物(靶基因序列来源于线粒体基因组)对多重PCR反应条件进行优化,并确定该检测方法的检出限。结果表明:四重PCR方法最佳反应条件为牛、羊、猪、鸡源特异性引物浓度分别为0.16μmol∕L、0.40μmol∕L、0.16μmol∕L、0.16μmol∕L,退火温度58℃,退火时间45 s,循环次数40。在最佳反应条件下,所建立的牛、羊、猪和鸡4种动物源性成分四重PCR的g DNA检出限为25 pg。应用优化后的四重PCR方法对20份市售肉制品样本进行盲样检测,验证鉴别方法的准确性,结果与现行标准的检测结果一致,掺假率达45%。本试验为该4种动物源性成分的快速检测提供了技术支撑。

分类号： TS251.7

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