文献类型: 中文期刊
第一作者: 李洪涛
作者: 李洪涛;张新涛;刘明;刘春国;杜金玲;石薇琳;孙恩成
作者机构: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所;黑龙江八一农垦大学
关键词: A型禽流感病毒;M2e基因;原核表达;多克隆抗体;免疫保护力
期刊名称: 中国预防兽医学报
ISSN: 1008-0589
年卷期: 2010 年 32 卷 10 期
页码: 795-799
收录情况: 北大核心 ; CSCD
摘要: 为研究含禽流感病毒(AIV)不同拷贝数基质蛋白胞外功能区(M2e)亚单位疫苗在SPF鸡体中的免疫保护效力差异,根据已发表的高致病性AIV M2基因序列设计合成两对引物,利用PCR技术扩增单个M2e基因片段,以此为基础顺次串联得到不同拷贝数的M2e基因片段,并将其克隆到pMAL-C2x载体中,构建不同拷贝数的A型AIV M2e基因的重组表达质粒,转化大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞,经IPTG诱导表达,SDS-PAGE鉴定。表达产物经纯化后免疫家兔、SPF鸡,制备抗M2e融合蛋白的多克隆抗体。Western blot和间接免疫荧光试验检测纯化的融合蛋白免疫原性,间接ELISA测定鸡血清抗体水平,表明MBP-3M2e融合蛋白的抗体水平较高,且MBP-3M2e亚单位疫苗产生最好的免疫保护力。
分类号: S852.65
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