虾夷扇贝过敏原tropomyosin的克隆表达、纯化及免疫学鉴定

文献类型： 中文期刊

第一作者： 刘志刚

作者： 刘志刚;邬玉兰;吴淑勤;石存斌;夏皓玉;陈丽斐

作者机构：

关键词： 虾夷扇贝;变应原;原肌球蛋白;表达纯化

期刊名称： 水生生物学报

ISSN： 1000-3207

年卷期： 2010 年 34 卷 05 期

页码： 979-983

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 从虾夷扇贝(Patinopecten yessoensis)肌肉中提取总RNA,RT-PCR克隆虾夷扇贝中变应原原肌球蛋白的全长基因,根据序列设计带有酶切位点的特异性引物,扩增扇贝tropomyosin的完整开放阅读框,与pET-28a载体连接并转化大肠杆菌Escherichia.coli BL21(DE3),诱导表达后,Ni2+亲和层析柱纯化重组蛋白,Western-blot检测其免疫学活性。经序列测定,该基因含有长度为855bp的开放阅读框,编码284个氨基酸,其在GenBank数据库中的登录号为EU839640。SDS-PAGE检测该重组变应原在大肠杆菌中高效表达36kD的目的蛋白,且重组变应原具有良好的IgE结合活性。研究获得了具有变应原活性的重组虾夷扇贝tropomyosin,为扇贝过敏性疾病的诊断和治疗奠定了基础。

分类号： R593.1

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