一种利用水提物快速简便检测烟草中TMV的方法

文献类型： 中文期刊

第一作者： 杨金广

作者： 杨金广;张帅;申莉莉;钱玉梅;李晓;王凤龙;段燕平;林北森;王永;曹娜

作者机构：

关键词： 烟草普通花叶病毒;快速检测;水提物

期刊名称： 中国烟草科学

ISSN： 1007-5119

年卷期： 2011 年 32 卷 05 期

页码： 20-23

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 由烟草普通花叶病毒(Tobacco mosaic virus,TMV)侵染所致的植物病毒病是世界性的难题,具有寄主广泛,易于传播等特点。笔者研究了一种快速简捷检测烟草中TMV的方法,通过利用无菌水研磨TMV侵染后发病的烟草病叶,取上清液进行1%的琼脂糖凝胶电泳检测,可检测到一条特异性的,大小为6 000 bp的电泳条带,而在健康烟草叶片水提物中却检测不到该电泳条带的存在。以TMV复制酶基因片段为探针,对该特异性电泳条带进行Northern-blotting分析。结果表明,水提物中的电泳条带与TMV复制酶基因探针发生较强的杂交信号,暗示该条带可能为TMV的基因组。因此,该方法可在10 min内方便快速的检测烟株中TMV的存在,避免了常规血清学检测和分子检测(RT-PCR和western-blot)等方法的昂贵试剂和繁琐的操作步骤。但是该方法的水提取物在室温下不稳定,当静止3 h以上,就很难再检测到特异性的电泳条带。

分类号： S435.72

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