牙鲆rnd1基因克隆、表达模式及与抗病力的关系

文献类型： 中文期刊

第一作者： 张子威

作者： 张子威;王磊;李开敏;卢昇;郑卫卫;陈松林

作者机构：

关键词： 牙鲆;rnd1;迟缓爱德华氏菌;抗病免疫;抑菌活性

期刊名称： 渔业科学进展

ISSN： 2095-9869

年卷期： 2023 年 003 期

页码： 52-63

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 迟缓爱德华氏菌病是海水鲆鲽鱼类的主要病害，发掘抗病分子标记辅助育种是十分有效的策略。本研究以牙鲆（Paralichthys olivaceus） rnd1基因（Pornd1）为对象，对该基因在牙鲆抗病免疫方面的作用进行系统分析。首先对Pornd1基因进行克隆鉴定和抗病相关单核苷酸多态性位点的定位，然后利用荧光定量PCR （qRT-PCR）对Pornd1基因的组织分布、细菌感染后表达情况以及在抗病和易感家系中的表达水平进行检测。结果显示，Pornd1 c DNA开放阅读框为699 bp，编码232个氨基酸。结合前期GWAS分析数据，本研究对Pornd1基因扩增和测序，确定Pornd1基因内含子2上存在一个抗迟缓爱德华氏菌病相关单核苷酸多态性位点，该位点在易感家系和抗病家系中分别是C/T，抗病家系（freqT=0.92）高于易感家系（freqT=0.20），具有显著性差异（P＜0.05）。Pornd1在心、肝和肾中的相对表达量较高；迟缓爱德华氏菌感染后肝、肾和脾中Pornd1的表达量在6 h降低后逐渐升高，在48 h达到最高。Pornd1在抗病家系肝脏中的表达量显著高于易感家系。在蛋白水平，利用大肠杆菌（Escherichia coli）表达系统表达PoRnd1重组蛋白，检测其抑菌活性，发现PoRnd1重组蛋白对金黄色葡萄球菌（Staphylococcus aureus）、大肠杆菌、迟缓爱德华氏菌（Edwardsiella tarda）和哈维氏弧菌（Vibrio harveyi）均具有一定抑菌活性。本研究揭示了Pornd1在牙鲆免疫抗病方面的作用，为开展牙鲆抗病分子育种提供了一个有效标记，并为解析其抗病性状的遗传机制提供理论基础。

分类号： S943

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