抗马动脉炎病毒N蛋白单克隆抗体的制备及B细胞抗原表位的鉴定

文献类型： 中文期刊

第一作者： 赵世华

作者： 赵世华;戚亭;郭巍;田志革;朱超

作者机构：

关键词： 马动脉炎病毒;单克隆抗体;肽扫描;表位

期刊名称： 中国兽医科学

ISSN： 1673-4696

年卷期： 2013 年 10 期

页码： 1035-1039

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 为鉴定马动脉炎病毒(EAV)N蛋白的抗原表位,利用原核表达系统表达N蛋白,用其免疫6周龄BALB/c小鼠,将小鼠脾细胞与骨髓瘤SP2/0细胞融合获得杂交瘤细胞,通过以重组N蛋白为包被抗原的间接ELISA方法筛选出2株能稳定分泌抗N蛋白的单克隆抗体(MAb),分别将其命名为2B3和2B9,其重链属于IgG1,轻链属于κ链。Western-blot证明,2株MAbs均能识别重组N蛋白。间接免疫荧光(IFA)试验证明,2株MAbs均与EAV呈阳性反应。用肽扫描法将N基因截短为具有相互部分重叠的11段,表达带HIS标签的重组蛋白,与MAb 2B3和MAb 2B9进行Western-blot和ELISA反应后,针对表位序列11 ASFRNGRRRQPTSYND26,进一步通过合成短肽对2株MAbs进行精确定位;结果表明,2B3识别的抗原表位为18 RRQPTSYND26,2B9针对的抗原表位为18 RRQPTSYND26。本研究结果为建立EVA的血清学检测方法及研究N蛋白的结构和功能奠定了基础。

分类号： S852.65

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