CP4-EPSPS蛋白抗体的制备及其夹心ELISA定量检测方法的建立

文献类型： 中文期刊

第一作者： 候吉超

作者： 候吉超;李忠鹏;李小宇;张春雨;于寒松;王永志

作者机构：

关键词： CP4-EPSPS;酶联免疫吸附(ELISA);大豆;抗体;检测

期刊名称： 食品工业科技

ISSN： 1002-0306

年卷期： 2020 年 41 卷 14 期

页码： 69-74

收录情况： 北大核心

摘要： 为了快速高效地检测转Cp4 epsps基因抗除草剂大豆,本研究利用已制备的CP4-EPSPS蛋白免疫实验动物,获得5株CP4-EPSPS蛋白鼠单克隆抗体及3份羊抗血清,建立了CP4-EPSPS蛋白双抗夹心酶联免疫吸附(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)检测方法,同时利用该方法对结荚期的Cp4 epsps转基因抗除草剂大豆的根、茎、叶、种子进行定量检测。结果显示,最佳检测条件为捕获抗体1D12,工作浓度1.25μg/mL,包被酶标板,4℃静置过夜,检测样品20℃孵育45 min,检测抗体8092,工作浓度2.5μg/mL,20℃孵育30 min;CP4-EPSPS蛋白在模拟大豆环境中最低检测限为3.6 ng/mL,检测范围为7.5～125 ng/mL;重复性变异系数小于15%。利用上述检测条件,在转Cp4 epsps基因抗除草剂大豆的根、茎、叶、种子中均检测到CP4-EPSPS蛋白的表达,且各组织部位表达量差异显著,其中CP4-EPSPS蛋白在叶片中表达量最高,茎、种子、根中CP4-EPSPS蛋白表达量逐渐降低。

分类号： TS207.3

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