牛呼吸道病原体四重PCR检测方法的建立与应用
文献类型: 中文期刊
第一作者: 沈思思
作者: 沈思思;冯万宇;陈亮;兰世捷;李丹;张蕾;周景明;刘雪松;张国华;王欢;王岩;刘文
作者机构:
关键词: 腺病毒;呼吸道合胞病毒;支原体;冠状病毒;四重PCR
期刊名称: 现代畜牧科技
ISSN: 2095-9737
年卷期: 2025 年 003 期
页码: 5-8
摘要: 为建立一种可同时检测牛腺病毒3(BAdV-3)、牛呼吸道合胞体病毒(BRSV)、溶血性曼氏杆菌(MH)和牛冠状病毒(BCoV)的四重PCR方法,根据Genbank公布的BAdV-3、BRSV、MH和BCoV基因保守序列设计了特异性引物4对,通过对退火温度和引物浓度的筛选,并验证了其特异性、敏感性和重复性,建立了能够同时检测BAdV-3、BRSV、MH和BCoV的四重PCR方法,初步应用于临床。结果显示,最佳退火温度为54℃,最佳引物浓度为0.5μmol/L;其特异性结果显示四重PCR只能检出BAdV-3、BRSV、MH和BCoV 4种病原体,对BAdV-3、BRSV、MH和BCoV最低检出限分别为1.67×10~4、1.58×10~4、1.75×10~3、1.29×10~3copies/μL,建立的四重PCR对40份临床样本进行检测,结果与单一PCR检测结果一致。结果表明,该研究建立的四重PCR方法可用于BAdV-3、BRSV、MH和BCoV的流行病学调查。
分类号: S858.23
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