猪流行性腹泻病毒N蛋白的真核表达及其亚细胞定位的初步分析

文献类型： 中文期刊

第一作者： 吕茂杰

作者： 吕茂杰;冯力;时洪艳;陈建飞;孙东波;申识川;崔小辰;王承宝;范秀萍

作者机构：

关键词： 猪流行性腹泻病毒;核衣壳蛋白;真核表达;亚细胞定位

期刊名称： 畜牧兽医学报

ISSN： 0366-6964

年卷期： 2009 年 40 卷 05 期

页码： 691-696

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 以构建的含有编码猪流行性腹泻病毒CV777株核衣壳蛋白(N)基因的阳性质粒pMDT-18-N为模板,用含有KpnⅠ和XhoⅠ酶切位点的上、下游引物扩增获得N基因,该PCR产物经KpnⅠ和XhoⅠ双酶切后定向克隆到经相同双酶切的真核表达载体pcDNA3.1(+)中,经过酶切鉴定和测序鉴定,将构建的重组质粒命名为pcD-NA3.1(+)-N,且未发现碱基的缺失和插入。用脂质体法将pcDNA3.1(+)-N转染Vero E6细胞,在48 h后,以针对猪流行性腹泻病毒核衣壳蛋白的鼠源`多抗血清进行Western blot、免疫荧光检测,并运用共聚焦显微镜分析N蛋白的亚细胞定位。结果表明N基因能在真核细胞Vero E6中正确表达,共聚焦分析结果表明N蛋白在细胞质和细胞核中定位。

分类号： S852.659.6

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