猪轮状病毒TaqMan实时荧光定量RT-PCR方法的建立

文献类型： 中文期刊

第一作者： 陈如敬

作者： 陈如敬;章秋月;陈秋勇;修金生;吴学敏;严山;周伦江

作者机构：

关键词： 猪轮状病毒;TaqMan;实时荧光定量RT-PCR方法

期刊名称： 福建农林大学学报(自然科学版)

ISSN： 1671-5470

年卷期： 2018 年 02 期

页码： 212-216

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 根据GenBank中登录的猪轮状病毒(PoRV)VP6基因序列特征,设计特异性的引物和探针,条件优化后,建立检测PoRV TaqMan实时荧光定量RT-PCR方法.结果表明:建立的Taq Man实时荧光定量RT-PCR方法敏感性高,最低可检测192拷贝·μL~(-1);特异性强,对猪常见病原(如猪流行性腹泻病毒、猪传染性胃肠炎病毒、猪瘟病毒和猪流行性乙型脑炎病毒等)检测均为阴性;重复性好,扩增相关系数为0.999,其组内和组间变异系数分别为0.25%~1.26%和0.31%~1.49%.对临床收集的79份猪腹泻病料进行常规RT-PCR检测,检测出阳性样品4份,阳性率为5.06%(4/79);对这79份病料进行TaqMan实时荧光定量RT-PCR方法检测,检测出阳性样品6份,阳性率为7.59%(6/79);同时,4份经RT-PCR检测为阳性的样品经TaqMan实时荧光定量RT-PCR方法检测均为阳性,符合率达100%.本研究建立的方法为PoRV早期感染诊断提供检测手段.

分类号： S852.651

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