菠萝凋萎相关病毒-1实时荧光定量RT-PCR检测体系的建立与应用

文献类型: 中文期刊

第一作者: 胡加谊

作者: 罗志文;李向宏;范鸿雁;周朋;章绍延;张治礼;刘志昕;何凡

作者机构:

关键词: 菠萝凋萎相关病毒-1;TaqMan探针;实时荧光定量RT-PCR;检测

期刊名称: 植物保护

ISSN: 0529-1542

年卷期: 2014 年 06 期

页码: 116-121+125

收录情况: 北大核心 ; CSCD

摘要: 菠萝凋萎相关病毒-1(Pineapple mealybug wilt associated virus-1,PMWaV-1)是田间检出率最高的菠萝凋萎病毒。本研究根据PMWaV-1CP基因保守序列设计特异性TaqMan探针和引物,建立并优化了PMWaV-1实时荧光定量RT-PCR检测方法。优化后的反应体系制备的标准曲线为y=-3.307×log x+38.18,相关系数r2为0.998。试验结果表明,该方法能特异性地检测PMWaV-1,对PMWaV-2、3和阴性对照均无反应;最低检测限达到40拷贝。重复性试验表明批内和批间变异系数均小于1.98%,是一种操作简便、特异性强、灵敏度高、重复性较好的PMWaV-1定量检测方法。样品检测结果表明PMWaV-1在菠萝植株老叶、嫩叶和吸芽中的病毒含量呈递减趋势。

分类号: S436.68

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