羊痘病毒P32基因真核表达载体的构建、表达及其免疫原性

文献类型： 中文期刊

第一作者： 陈轶霞

作者： 陈轶霞;才学鹏;景志忠;丁军涛;王颖;蒙学莲;张燕;贾万忠;乔军;闫鸿斌;房永祥;陈国华;骆学农

作者机构：

关键词： 羊痘病毒;P32基因;真核表达载体;表达;免疫原性

期刊名称： 病毒学报

ISSN： 1000-8721

年卷期： 2008 年 24 卷 02 期

页码： 133-137

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 通过PCR方法扩增全长P32基因和截去跨膜区的P32基因(MP32),将其分别克隆到真核表达载体pcDNA3·1(+)和已插入CpG序列的pcDNA3·1-CpG中,构建pcDNA3·1-P32、pcDNA3·1-CpG-P32和pcDNA3·1-CpG-MP32质粒;用脂质体法转染BHK-21细胞,通过间接免疫荧光(IFA)试验验证其表达效果;经肌肉免疫注射健康BALB/c小鼠,用间接ELISA法检测抗体;在免疫后的第3、5周取免疫小鼠的脾细胞,用流式细胞仪检测CD4+和CD8+T细胞亚群。结果所构建的真核表达载体在BHK-21细胞中都能表达P32蛋白;免疫小鼠血清在免疫第2周后均能检测到羊痘特异性IgG抗体;免疫组小鼠脾脏CD4+T细胞数目和CD4+/CD8+T细胞比值明显高于对照组。结果提示,所构建的真核载体可诱导小鼠产生特异性体液免疫应答,并能刺激小鼠产生较强的细胞免疫应答。

分类号： S852.5

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