青虾眼柄组织总RNA提取方法的比较和分析
文献类型: 中文期刊
第一作者: 王宁
作者: 王宁;傅洪拓;乔慧;吴滟;龚永生;蒋速飞;熊贻伟
作者机构:
关键词: 青虾;眼柄;RNA提取
期刊名称: 中国农学通报
ISSN: 1000-6850
年卷期: 2011 年 27 卷 03 期
页码: 378-382
收录情况: 北大核心 ; CSCD
摘要: 为了找到最适合青虾眼柄总RNA抽提的方法,本试验先后使用RNAiso Plus、RNeasy Mini Kit、Unizol等产品抽提青虾眼柄总RNA并在方法上进行了改良,通过电泳、紫外分光光度计和RT-PCR对总RNA进行检测和分析。结果表明RNAiso法抽提的RNA色素含量高;改良RNAiso法抽提的RNA有部分降解,含色素少,对反转录酶有一定的抑制作用但不影响RT-PCR;RNeasy Mini Kit能有效去除抑制反转录酶活性的色素且RNA无降解,但DNA污染严重;RNAiso结合RNeasy Mini Kit法和Unizol结合RNeasy Mini Kit法提取的RNA均无DNA污染,也没有抑制反转录酶活性的色素,但后者所提的RNA完整性好。因此,Unizol结合RNeasy Mini Kit法最适合青虾眼柄总RNA的提取,可获得高质量的RNA用于RT-PCR、cDNA文库构建、定量PCR等实验。
分类号: S917.4
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