猪流行性腹泻病毒S2蛋白间接ELISA检测方法的建立与应用

文献类型： 中文期刊

第一作者： 王亚涛

作者： 王亚涛;陶洁;李本强;程靖华;石迎;刘惠莉

作者机构：

关键词： 猪流行性腹泻病毒;间接ELISA;S2截短蛋白;IgG

期刊名称： 中国兽医科学

ISSN： 1673-4696

年卷期： 2021 年 003 期

页码： 269-274

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 本研究基于猪流行性腹泻病毒（porcine epidemic diarrhea virus,PEDV） S2截短蛋白,建立了特异性Ig G抗体的间接ELISA检测方法,用于临床PEDV特异性抗体水平的监测。前期筛选了富含中和表位的S2截短基因,体外表达后作为ELISA包被抗原,用于捕获PEDV Ig G抗体,以山羊抗猪HRP-Ig G作为二抗,通过条件优化,建立了检测猪血清中PEDV Ig G抗体的间接ELISA方法。最佳反应条件为:S2抗原蛋白的最佳包被浓度为2μg/m L,临床血清样品和酶标二抗的最佳稀释倍数分别为1∶400和1∶20 000。该方法的批内和批间重复变异系数（CV）分别为1.81%～8.52%和1.18%～7.41%,重复性较好;该方法检测猪伪狂犬病病毒（PRV）、猪圆环病毒2型（PCV2）、猪瘟病毒（CSFV）及牛病毒性腹泻病毒（BVDV）的阳性血清时结果均为阴性,特异性较强。该方法与商品化PEDV抗体检测试剂盒相比较,阳性符合率为95.18%,阴性符合率为91.43%,说明该方法可用于临床血清抗体筛查。进一步利用此方法对324份猪的临床血清样品进行检测,发现PEDV抗体阳性血清占62.96%,与临床现状基本吻合。上述结果表明,该方法适用于临床猪群中PEDV Ig G抗体水平普查,为PEDV的疫病防控及灭活疫苗评价提供了有效的技术支持。

分类号： S852.651

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