绿盲蝽表皮蛋白基因AlCP17的克隆、多克隆抗体制备及表达谱分析
文献类型: 中文期刊
第一作者: 谭永安
作者: 谭永安;张杰钰;姜义平;赵静;肖留斌;戈林泉
作者机构:
关键词: 绿盲蝽;表皮蛋白;RACE;原核表达;多克隆抗体
期刊名称: 昆虫学报
ISSN: 0454-6296
年卷期: 2023 年 66 卷 001 期
页码: 37-44
收录情况: 北大核心 ; CSCD
摘要: [目的]本研究旨在通过克隆绿盲蝽Apolygus lucorum表皮蛋白(cuticular protein,CP)基因AlCP17、制备其多克隆抗体和分析其时空表达特性,为AlCP17蛋白功能的研究奠定基础,也为进一步解析绿盲蝽表皮发育过程中的信号通路图谱提供依据.[方法]基于前期转录组数据克隆绿盲蝽AlCP17的cDNA全长序列并进行生物信息学分析;构建AlCP17原核表达载体pCZN1-AlCP17并转化大肠杆菌Escherichia coli进行体外表达,利用纯化后的重组蛋白制备AlCP17蛋白多克隆抗体;qRT-PCR检测AlCP17在绿盲蝽不同发育阶段(1-5龄若虫和成虫)和3龄初期若虫不同组织(头、胸、足、中肠、脂肪体和表皮)中的表达谱.[结果]克隆获得绿盲蝽AlCP17全长cDNA序列(GenBank登录号:OM302231),其开放阅读框长594 bp,编码197个氨基酸,预测蛋白分子量为21.69 kD,理论等电点为6.11.编码的蛋白质具有典型的表皮蛋白结构特征,含有节肢动物表皮蛋白几丁质保守结合域(non-cysCBD),即Chitin_bind_4结构域;氨基酸序列比结果对显示,AlCP17与半翅目(Hemiptera)臭虫科(Cimicidae)温带臭虫Cimex lectularius的CPA2B-like的氨基酸序列一致性最高(76.29%);系统发育进化树显示,CP是一种高度保守的蛋白,与温带臭虫的CPA2B-like和茶翅蝽Halyomorpha halys的CP7-like相似性高.IPTG诱导获得原核表达重组蛋白AlCP17,经纯化后制备的AlCP17多克隆抗体纯化效果较好,可以用于后续实验.AlCP17在绿盲蝽不同发育阶段和3龄初期若虫不同组织中均有表达,在初孵1龄若虫中表达量达到峰值,且在若虫各龄期的末期表达量显著上升;在3龄初期若虫中肠中表达量最高.[结论]克隆了绿盲蝽AlCP17基因cDNA全长序列,AlCP17具有昆虫表皮蛋白的典型特征,AlCP17在绿盲蝽体内的表达具有发育阶段特异性和组织特异性.这些结果为今后研究这一蛋白在绿盲蝽表皮发育过程中的生理功能奠定了基础.
分类号: Q966
- 相关文献
[1]莫氏巴贝斯虫滑动体组件蛋白基因gap45、gap50、myo A和mlc的克隆表达与多克隆抗体制备. 王锦明,刘爱红,任巧云,马米玲,刘志杰,李安岩,李有全,赵帅阳,张浩浩,殷宏,罗建勋,关贵全. 2013
[2]莫氏巴贝斯虫actin,aldolase和trap基因的克隆表达与多克隆抗体的制备. 王锦明,杨吉飞,李安岩,刘爱红,任巧云,马米玲,刘志杰,李有全,赵帅阳,张浩浩,殷宏,罗建勋,关贵全. 2013
[3]莫氏巴贝斯虫actin;aldolase和trap基因的克隆表达与多克隆抗体的制备. 王锦明,杨吉飞,李安岩,刘爱红,任巧云,马米玲,刘志杰,李有全,赵帅阳,张浩浩,殷宏,罗建勋,关贵全. 2013
[4]莫氏巴贝斯虫滑动体组件蛋白基因gap45、gap50、myoA和mlc的克隆表达与多克隆抗体制备. 王锦明,刘爱红,任巧云,马米玲,刘志杰,李安岩,李有全,赵帅阳,张浩浩,殷宏,罗建勋,关贵全. 2013
[5]莫氏巴贝斯虫滑动体组件蛋白基因gap45、gap50、myo A和m/c的克隆表达与多克隆抗体制备. 王锦明,刘爱红,任巧云,马米玲,刘志杰,李安岩,李有全,赵帅阳,张浩浩. 2013
[6]凡纳滨对虾造血激素基因全长序列分析及其克隆与表达. 梁高峰,梁艳,成君军,张士璀,黄倢. 2012
[7]甘蓝型油菜BnADC基因的克隆及原核表达. 洪林,闫晓红,袁亚宾,刘王辉,胡长清,李晨,陈春丽,魏文辉. 2012
[8]牦牛Linc24063的克隆鉴定及其与miRNAs表达水平的相关性分析. 王会,柴志欣,朱江江,钟金城,张成福,信金伟. 2019
[9]大菱鲆(Scophthalmus maximus)蛋白质二硫键异构酶SmPDIA3的表达分析和功能验证. 唐启政,孙志宾,王新安,马爱军,杨双双,黄智慧. 2019
[10]豆状带绦虫胰岛素样生长因子受体基因的克隆分析及原核表达. 杨锐,张少华,骆学农,史云洁,曾巧英. 2016
[11]绿盲蝽核受体基因AlE75D的克隆和性质分析. 谭永安,赵旭东,肖留斌,孙洋,赵静,柏立新,郝德君. 2017
[12]绿盲蝽气味结合蛋白AlucOBP7的表达及气味结合特性. 刘靖涛,谷少华,朱晓强,张永军,郭予元. 2013
[13]绿盲蝽化学感受蛋白基因AlucCSP1的克隆、表达谱分析及结合特征. 滑金锋,张帅,崔金杰,王道杰,王春义,雒珺瑜,吕丽敏. 2012
[14]绿盲蝽膜结合型海藻糖酶ALTre-2基因表达、纯化及酶学特性. 谭永安,肖留斌,柏立新,孙洋. 2013
[15]绿盲蝽水溶性海藻糖酶ALTre-1基因原核表达、纯化与酶学特性. 谭永安,肖留斌,孙洋,柏立新. 2013
[16]绿盲蝽磷脂酶C(AlPLC)的表达、纯化及酶学性质. 谭永安,赵旭东,郝德君,肖留斌,柏立新,赵静,孙洋,姜义平. 2017
[17]绿盲蝽超气门蛋白ALUSP的克隆、原核表达及纯化. 谭永安,肖留斌,孙洋,赵静,柏立新. 2014
[18]Carboxin抗性基因(Cbx~R)原核表达及多克隆抗体的制备. 李小宇,张正坤,王秋华,张春雨,张淋淋. 2015
[19]猪CD40L基因的原核表达及特异性多克隆抗体制备. 薛刚,祝长青,郑其升,张雪花,李倬,侯继波. 2011
[20]延边白鹅IFN-α基因的原核表达及其表达产物生物学活性的研究. 彭永刚,陈海迪,高旭,张颖,鲁承. 2014
作者其他论文 更多>>
-
我国新发现夜蛾黑卵蜂孤雌产雌品系及其体内沃尔巴克氏体分子检测
作者:赵静;谭永安;谢永辉;宁德凯;王德海;陈华燕;石萍丽;肖留斌
关键词:夜蛾黑卵蜂;孤雌产雌品系;沃尔巴克氏体;分子检测
-
纳米载体在害虫RNA农药应用中的研究进展
作者:姜义平;赵静;肖留斌;徐德进;徐广春;张昕;谭永安
关键词:纳米载体;害虫;RNA农药;双链RNA;小干扰RNA
-
混合型乳酸菌制剂对两种菠萝叶青贮品质的影响
作者:张秀芬;韦巧云;蒋娟娟;杨祥燕;蔡元保;赵静;郭素云;徐健
关键词:菠萝叶;青贮;混合型乳酸菌制剂;营养成分;发酵品质
-
不同种苗来源的菠萝植株形态及果实性状比较分析
作者:蒋娟娟;张秀芬;覃潇敏;赵静;周彩霞;韦巧云;黄丽君;郭素云;郭李怡;徐健
关键词:菠萝;裔芽;吸芽;植株形态;果实性状
-
寒地大球盖菇引种栽培与农艺性状评价
作者:张鹏;王延锋;史磊;胡元军;王金贺;刘姿彤;盛春鸽;于海洋;赵静;王菲
关键词:大球盖菇;寒地栽培;农艺性状;产量
-
改进的QuEChERS/液相色谱-质谱联用法测定椰汁饮料中90种农药及其代谢物残留量
作者:潘永波;赵静;万娜;刘春华;李春丽
关键词:椰汁;农药残留;QuEChERS;液相色谱-质谱联用法
-
抗生素和不同秸秆种类对双孢菇农艺性状的影响
作者:王菲;王延锋;盛春鸽;于海洋;赵静;高智涛
关键词:抗生素;秸秆;基质理化性质;子实体农艺性状
