鹅β-防御素基因克隆与生物学特性的初步分析

文献类型： 中文期刊

第一作者： 周财源

作者： 周财源;蔺利娟;韩宗玺;邵昱昊;刘胜旺;马得莹

作者机构：

关键词： 鹅β-防御素5;重组蛋白;抗菌活性

期刊名称： 畜牧兽医学报

ISSN： 0366-6964

年卷期： 2011 年 42 卷 08 期

页码： 1193-1200

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 本试验采用RT-PCR方法,从鹅的骨髓细胞中扩增到禽β-防御素(AvBD)基因。测序结果表明,该基因的cDNA大小为201 bp,编码66个氨基酸。经遗传进化分析发现,该基因推导的氨基酸序列与鸡AvBD5的同源性最高,达84.8%。因此,将其命名为鹅AvBD5。进一步将该基因定向插入到pGEX-6p-1的EcoRⅠ和SalⅠ双酶切位点上,构建pGEX-AvBD 5重组表达质粒。将重组质粒转化大肠杆菌BL 21,于37℃不同时间进行诱导表达,SDS-PAGE检测外源基因的表达情况。结果表明,重组鹅AvBD 5融合蛋白的分子量约为32 ku,重组蛋白以包涵体形式存在。采用菌落计数法进行抗菌活性测定,结果表明,重组鹅AvBD 5有广谱的抗菌活性,对11种革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌均具有较强抗菌作用。此外,该蛋白对温度和pH有较高的稳定性。

分类号： S835

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