使用优化的信号肽和密码子在Expi293F细胞中高表达重链抗体可变区抗体

文献类型： 中文期刊

第一作者： 谭书桢

作者： 谭书桢;董虎;潘颂佳;穆素雨;陈永杰;张韵;孙世琪;郭慧琛

作者机构：

关键词： 重链抗体可变区抗体;信号肽;密码子优化;表达

期刊名称： 生物工程学报

ISSN： 1000-3061

年卷期： 2024 年 40 卷 011 期

页码： 4219-4227

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 重链抗体可变区抗体(variable domain of heavy-chain antibody, VHH)已被广泛用于药物治疗、诊断和研究。大肠杆菌是生产VHH最常用的表达系统，但可能会导致VHH的生物活性降低。哺乳动物细胞是目前最理想的VHH表达宿主之一。本研究通过优化VHH的信号肽(signal peptide,SP)和密码子，以期提高VHH在Expi293F细胞中的产量。VHH1-Fc被用于筛选SP，通过酶联免疫吸附试验(enzyme-linked immunosorbent assay, ELISA)筛选出的SP IFN-α2分泌效果最佳；通过提高基因的GC3和GC含量，VHH1的产量提高了约1倍，且对VHH1与A型塞内卡病毒(Senecavirus A, SVA)的结合活性无明显影响；其他5种重组VHHs分别连接SP IFN-α2并进行密码子优化，其平均产量大于191.6mg/L。此外，这些VHHs在培养上清中具有高纯度和高回收率的优点。本研究证实SP IFN-α2和密码子优化可以在Expi293F细胞高效表达VHH，为VHH的大规模生产提供了参考。

分类号： Q78

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