基因Ⅶ型新城疫病毒SYBR Green Ⅰ实时荧光定量PCR检测方法的建立

文献类型： 中文期刊

第一作者： 孟春春

作者： 孟春春;段云兵;仇旭升;金仕强;詹媛;张向乐;于圣青;丁铲

作者机构：

关键词： Ⅶ型新城疫病毒;SYBR Green Ⅰ;实时荧光定量RT-PCR

期刊名称： 中国动物传染病学报

ISSN： 1674-6422

年卷期： 2011 年 19 卷 05 期

页码： 8-14

摘要： 根据Ⅶ型新城疫病毒基质蛋白基因保守序列设计并合成特异性引物,建立快速检测Ⅶ型新城疫病毒的实时荧光定量RT-PCR方法。通过RT-PCR方法克隆Ⅶ型新城疫病毒M基因靶序列,并将其连入T-Easy载体,制备阳性标准品,优化反应条件,以10倍系列稀释的标准品绘制标准曲线,其相关系数为0.999。检测结果显示,该方法的灵敏度可达100 copies/μL,而且特异性良好,除Ⅶ型新城疫病毒外,对Ⅱ型/Ⅲ型/IV型/Ⅸ型新城疫病毒、H5亚型禽流感病毒、H9亚型禽流感病毒、鸡传染性支气管炎病毒检测结果均为阴性。本研究所建立的检测方法重复性好,批内和批间变异系数均小于5%。对40份实验感染样品的检测结果表明,其检出率为95%,而常规RT-PCR方法检出率仅为70%,表明该方法比常规RT-PCR检测方法灵敏度更高、特异性更强。

分类号： S855.3

  • 相关文献

[1]基因Ⅶ型新城疫病毒SYBRGreenⅠ实时荧光定量PCR检测方法的建立. 孟春春,段云兵,仇旭升,金仕强,詹媛,张向乐,于圣青,丁铲. 2011

[2]猪轮状病毒SYBR Green Ⅰ实时荧光定量PCR检测方法的建立. 陈小金,陈建飞,时洪艳,张志榜,冯力. 2010

[3]羊传染性脓疱病毒SYBR Green Ⅰ实时荧光定量PCR检测方法的建立. 林裕胜,江锦秀,张靖鹏,江斌,游伟,胡奇林. 2018

[4]猪细环病毒k2型SYBR Green Ⅰ实时荧光定量PCR方法的建立. 陈如敬,黄秋宇,修金生,吴学敏,严山,车勇良,周伦江. 2016

[5]贝类中GⅠ、GⅡ诺如病毒快速检测与分群方法的建立. 苏来金,赵峰,马丽萍,周德庆. 2019

[6]基于SYBR Green Ⅰ荧光定量PCR建立生乳及乳制品沙门氏菌快速检测技术. 张巧艳,陈亭亭,陈笑芸,杨胜利,缪青梅. 2012

[7]猪血清淀粉样蛋白3分子SYBR Green Ⅰ实时荧光定量PCR检测方法的建立及初步应用. 郇贝丽,刘珂,马改妮,魏建超,邵东华,李蓓蓓,邱亚峰,石元元,马志永. 2017

[8]SYBR Green Ⅰ实时荧光定量RT-PCR检测水泡性口炎病毒方法的建立. 李嘉阳,赵佳男,秦彤,季芳,李刚,王承民. 2022

[9]鸭冠状病毒实时荧光定量PCR检测方法的建立及应用. 高月花,朱彤,刘丽萍,郭效珍,马芹,胡峰,汪建华,于可响,黄兵,宋敏训,李玉峰. 2023

[10]SYBR Green Ⅰ荧光定量RT-PCR检测埃博拉病毒方法的建立. 刘阳,史子学,马玉堃,王皓婷,王宗尧. 2012

[11]小反刍兽疫病毒实时荧光定量PCR检测方法的建立. 李林杰,刘萍,马鹏,王悦萦,郭富城,马晓霞,周建华,柏家林. 2018

[12]Real-time RT-PCR检测J亚群禽白血病病毒的研究. 张在平,田进,孟庆文,马学恩. 2010

[13]绵羊肺炎支原体SYBR Green Ⅰ实时荧光定量PCR检测方法的建立. 林裕胜,江锦秀,张靖鹏,游伟,胡奇林. 2018

[14]木尔坦棉花曲叶病毒SYBR Green Ⅰ实时荧光定量PCR检测方法. 赵蕊,吕利华,陈婷,何自福,何余容. 2015

[15]草原红牛不同组织雄激素受体基因表达量检测及比较研究. 秦立红,刘伟英,张丽颖,张金玉,张国梁,赵玉民,张嘉保,赵志辉. 2010

[16]鸭坦布苏病毒SYBR GreenⅠ实时荧光定量检测方法的建立. 万春和,朱海侠,施少华,黄瑜,程龙飞,傅光华,陈红梅. 2013

[17]鸭坦布苏病毒SYBR GreenI实时荧光定量检测方法的建立. 万春和,朱海侠,施少华,黄瑜,程龙飞,傅光华,陈红梅. 2013

[18]牛Th1/Th2型细胞因子实时荧光定量RT-PCR检测方法的建立及应用. 韩猛立,蔡日鹏,黄新,何延华,薄新文. 2011

[19]牛Toll样受体实时荧光定量PCR检测方法的建立. 韩猛立,黄新,何延华,宋天增,薄新文,钟发刚. 2011

[20]在水稻纹枯病菌菌核形成中5个基因的表达差异分析. 王伟,杨惠,王政逸,陈卫良. 2013

作者其他论文 更多>>

微信小程序