食用向日葵SSR-PCR反应体系的优化

文献类型： 中文期刊

第一作者： 胡小利

作者： 胡小利;马庆;包海柱;范瑞;孙希利;马蓉

作者机构：

关键词： 食用向日葵;SSR-PCR;体系优化

期刊名称： 华北农学报

ISSN： 1000-7091

年卷期： 2015 年 30 卷 02 期

页码： 161-165

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 为建立食用向日葵分子标记反应体系,以食用向日葵四叶期叶片为DNA模板提取材料,采用单因素试验和正交试验设计,对SSR-PCR反应体系中的6因素(10×PCR Buffer、Mg2+、d NTPs、引物、Taq DNA聚合酶和DNA模板)在5水平上进行正交优化试验,并比较了不同浓度Mg2+、Taq DNA聚合酶、模板DNA对扩增效果的影响,结果表明,各因素水平变化对反应体系的影响为Mg2+>Taq DNA聚合酶(引物)>DNA模板>10×PCR Buffer>d NTPs。最终建立食用向日葵SSR-PCR最佳反应体系为:在总体系为20μL的SSR-PCR反应体系中包括10×PCR Buffer 0.2mmol/L、Mg2+2.0 mmol/L、d NTPs 1.8 mmol/L、Taq DNA聚合酶0.2 U、DNA 50 ng、引物1.5 mmol/L。

分类号： S565.5

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