RNA干扰阔口游仆虫γ-微管蛋白基因表达的研究

文献类型： 中文期刊

第一作者： 曾红

作者： 曾红;陈文列;林能锋;林如辉;顾福康

作者机构：

关键词： 游仆虫;γ-微管蛋白;喂食法;RNAi

期刊名称： 福建师范大学学报(自然科学版)

ISSN： 1000-5277

年卷期： 2010 年 26 卷 02 期

页码： 94-97

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 根据阔口游仆虫微管蛋白基因序列设计1对引物,扩增出692bp的γ-微管蛋白基因片段,将之重组到L4440载体中,重组质粒转化到RNAase缺陷型E.coli HT115菌株中,并用IPTG诱导双链RNA的表达,将经诱导后的重组菌喂食游仆虫,诱导出RNAi表型,具体表现为虫体变小、变圆,约两周后游仆虫全部死亡.电镜观察表明,经诱导后的游仆虫部分纤毛杆横切面显示结构为9+0,部分纤毛杆膨胀变形并开始瓦解,原高度有序的微管排列结构消失.进一步证实喂食法可有效地产生RNAi,γ-微管蛋白基因沉默后游仆虫无法维持正常形态并死亡,观察到纤毛杆的超微结构发生明显的变化,由此推测γ-微管蛋白的表达和细胞调控在游仆虫细胞微管骨架的装配及其细胞生命活动中起重要作用.

分类号： Q78

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