不结球白菜金属硫蛋白基因的克隆及表达分析

文献类型： 中文期刊

第一作者： 刘东让

作者： 刘东让;侯喜林;张昌伟;肖栋

作者机构：

关键词： 不结球白菜;金属硫蛋白基因;qRT-PCR;原核表达

期刊名称： 西北植物学报

ISSN： 1000-4025

年卷期： 2018 年 12 期

页码： 2207-2214

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 通过RACE技术,从不结球白菜抗病品种‘苏州青’叶片克隆到金属硫蛋白(metallothionein)基因的全长cDNA序列(BcMT2)。序列分析结果表明,BcMT2基因的cDNA全长为528bp,其中开放阅读框长度为243bp,共编码80个氨基酸,相对分子质量为8.02×10~(3 )Da,理论等电点是4.61。氨基酸同源系统进化分析表明,不结球白菜BcMT2基因属于Ⅱ类植物MT2基因家族,且与同科植物的进化关系相近,其中与大白菜第5号染色体的基因(Bra029765)相似性最高(100%)。qRT-PCR分析表明,BcMT2基因在不结球白菜叶中表达最强;霜霉病菌诱导后,BcMT2基因在抗病品种‘苏州青’中的表达量于48h达到峰值,而在感病品种‘矮脚黄’中的表达量于72h达到峰值;盐处理条件下,BcMT2基因在抗病品种‘苏州青’中的表达量于12h达到峰值,而在感病品种‘矮脚黄’中的表达量于24h达到峰值;ABA处理下,‘苏州青’中其表达量于24h达到峰值,且在‘矮脚黄’中BcMT2基因的表达趋势与‘苏州青’类似;干旱处理条件下BcMT2基因的表达在两材料中均受到抑制。BcMT2原核表达分析发现,在37℃、1.0mmol·L~(-1)IPTG诱导2、4、6h后,均检测到了一条蛋白分子质量约为8×10~(3 )Da的表达特异条带,这与预期融合蛋白的相对分子质量的理论值8.02×10~(3 )Da相符。研究表明,不结球白菜BcMT2基因在受到生物胁迫和非生物胁迫等逆境条件下均发挥着重要作用,且BcMT2在大肠杆菌中成功实现融合表达,为进一步进行蛋白水平和转基因功能研究奠定了基础,也为选育高产、优质的不结球白菜新品种提供重要的理论依据。

分类号： S634.3`Q943.2

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