A型产气荚膜梭菌Fba重组干酪乳杆菌的构建与表达

文献类型: 中文期刊

第一作者: 杨启尧

作者: 杨启尧;范佳霖;秦达;曲艺;王嘉彬;余丽芸;史同瑞;侯喜林

作者机构:

关键词: A型产气荚膜梭菌;Fba基因;干酪乳杆菌;构建与表达

期刊名称: 黑龙江八一农垦大学学报

ISSN: 1002-2090

年卷期: 2024 年 36 卷 006 期

页码: 36-42,71

摘要: 为了构建重组乳酸菌,以A型产气荚膜梭菌全基因组DNA为模板,利用PCR技术扩增出Fba基因并将其连接到大肠杆菌表达载体p ET-28a上,鉴定正确后,用1.0 mmol·L-1IPTG诱导表达,最佳诱导表达时间为5 h。表达的目的蛋白纯化后与弗氏佐剂乳化制备抗血清,Western blot分析表明,目的蛋白能与制备的抗血清特异结合,具有很好的反应原性。将正确的Fba基因与p LA乳酸菌载体构建成重组质粒并电转至干酪乳杆菌中,Western blot结果显示,重组的干酪乳杆菌表达的蛋白与抗血清具有良好的反应原性。间接免疫荧光、流式细胞仪检测结果表明,目的蛋白能够展示表达到菌体表面。

分类号: S859.797

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