J亚群禽白血病病毒TCID_(50)不同测定方法的比较
文献类型: 中文期刊
第一作者: 孟凡峰
作者: 孟凡峰;范建华;徐步;董宣;崔治中;赵鹏
作者机构:
关键词: J亚群禽白血病病毒;间接免疫荧光试验;酶联免疫吸附试验;p27;组织细胞半数感染量
期刊名称: 中国兽医杂志
ISSN: 0529-6005
年卷期: 2015 年 51 卷 09 期
页码: 31-33
收录情况: 北大核心
摘要: 为比较不同方法在测定J亚群禽白血病病毒(ALV-J)组织细胞半数感染量(TCID50)上的差异,将ALV-J传染性克隆r NX0101株同一病毒保存液以10倍梯度稀释后按照常规方法分别接种已长满DF-1细胞和鸡胚成纤维细胞(CEF)的96孔板,维持7 d后取所有细胞培养上清以ALV-p27抗原检测试剂盒检测p27抗原,细胞固定后以ALV-J特异性单克隆抗体JE9进行间接免疫荧光(IFA)检测,确定病毒感染孔后按照Reed-Muench法分别计算两种方法在两种细胞上的TCID50。结果显示,ELISA法测定该病毒在DF-1细胞和CEF细胞上的TCID50分别为10-5.4TCID50/0.1 m L和10-4.666TCID50/0.1 m L,而IFA法测定该病毒在DF-1和CEF细胞上的TCID50分别为10-6.333TCID50/0.1 m L和10-5.2TCID50/0.1 m L。结果表明,IFA比ELISA具有更高的灵敏度,并且ALV-J在DF-1细胞上复制能力比CEF更强,在DF-1细胞上测定ALV-J的TCID50更为科学。
分类号: S852.65
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