绵羊肺炎支原体夹心ELISA检测方法的建立及初步应用

文献类型： 中文期刊

第一作者： 王晓楠

作者： 王晓楠;张纹纹;陈思宇;单依依;陈益;李文良;程子龙;杨蕾蕾;王金泉;刘茂军

作者机构：

关键词： 绵羊肺炎支原体;夹心ELISA;建立

期刊名称： 中国兽医科学

ISSN： 1673-4696

年卷期： 2024 年 54 卷 009 期

页码： 1202-1208

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 为建立绵羊肺炎支原体（Mycoplasma ovipneumoniae,MO）的抗原快速定量检测方法，本研究通过单克隆抗体筛选和条件优化，建立了一种检测MO抗原夹心ELISA检测方法，建立的ELISA方法的最优条件为：单克隆抗体1A11浓度为105μg/m L,37℃孵育1 h后4℃过夜包被；用10 g/L BSA 37℃封闭1 h；与超声处理的样品作用1.5 h；检测抗体浓度为3.81μg/m L,37℃作用2 h；酶标抗体1∶4 000稀释，37℃反应1.5 h；加入底物37℃避光反应10 min。建立的夹心ELISA方法批间和批内变异系数均低于10%，特异性、重复性、敏感性良好，本方法检测的抗原含量与MO的CCU呈正相关。本方法的建立为绵羊肺炎支原体的定量检测提供了新技术，可用于实验室MO培养物CCU含量的替代检测和MO疫苗生产过程中抗原的检测。

分类号： S852.62

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