一种三角帆蚌肌浆网Ca~(2+)-ATP酶基因cDNA的全长克隆与表达分析

文献类型： 中文期刊

第一作者： 张爱菊

作者： 张爱菊;刘士力;刘金殿;张根芳;周志明

作者机构：

关键词： 三角帆蚌;SERCA;克隆;基因表达;钙刺激

期刊名称： 浙江农业学报

ISSN： 1004-1524

年卷期： 2019 年 04 期

页码： 545-555

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 采用RACE技术,从三角帆蚌(Hyriopsis cumingii)鳃组织中成功克隆得到一种肌浆网Ca~(2+)-ATP酶(sarco/endoplasmic reticulum calcium ATPase,SERCA)基因的全长cDNA序列,共3 326 bp,包含201-bp 5’-UTR区域、3 060-bp编码框(ORF)和65-bp 3’-UTR。ORF共编码1 019个氨基酸,预测无信号肽。该基因氨基酸序列呈现出典型的Ca~(2+)-ATP酶特征,由Cation_ATPase_N、E1-E2_ATPase、Hydrolase、Cation_ATPase_C四种类型结构域组成,其内含SERCAs的常见结构组成包括磷酸化区域、异硫氰酸荧光素位点、FSBA结合位点、受磷蛋白结合区以及毒胡萝卜素位点。分析显示,该基因序列高度保守且与海洋软体动物具有最高同源性。荧光定量PCR检测,该基因在三角帆蚌外套膜、斧足、鳃、肝胰腺、性腺等5个组织中均有表达,且在鳃、外套膜、肝胰腺组织中表达较高。不同Ca~(2+)浓度处理试验的结果表明,随水体中Ca~(2+)浓度逐渐升高,该基因在外套膜中的表达水平呈先下降后上升趋势,并在Ca~(2+)浓度为60 mg·L~(-1)时达到最低值,80 mg·L~(-1)时达到最高值。同时在60 mg·L~(-1) Ca~(2+)浓度条件下,外套膜中SERCA基因的表达量随时间推移先上升,并于48 h时达到最高,而后逐渐下降。上述结果为进一步深入研究SERCA基因的功能及其调控机理奠定了基础。

分类号： S917.4

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