猪细环病毒k2型SYBR Green Ⅰ实时荧光定量PCR方法的建立

文献类型： 中文期刊

第一作者： 陈如敬

作者： 陈如敬;黄秋宇;修金生;吴学敏;严山;车勇良;周伦江

作者机构：

关键词： 猪细环病毒k2型;ORF2基因;SYBR Green Ⅰ;实时荧光定量PCR方法

期刊名称： 中国动物传染病学报

ISSN： 1674-6422

年卷期： 2016 年 05 期

页码： 10-15

收录情况： 北大核心

摘要： 为建立检测猪细环病毒k2型(Porcine Torque teno sus virus k2,PTTSu Vk2)SYBR GreenⅠ实时荧光定量PCR方法,本研究根据PTTSu Vk2 ORF2基因序列特征设计引物,建立基于SYBR GreenⅠ检测PTTSu Vk2的实时荧光定量PCR方法,该方法在PTTSu Vk2 ORF2基因含量为1.92×102~1.92×107 copies/μL反应范围内有很好的线性关系。扩增产物溶解曲线分析仅出现单一特异峰,无引物二聚体,Tm值为(83.83±0.08)℃,对猪圆环病毒(Porcine circovirus type 1 and type 2,PCV1和PCV2)、猪细小病毒(Porcine parvovirus,PPV)、猪博卡病毒5型(Porcine bovavirus type 5,Pbo V5)、猪细环病毒1a型(PTTSu V 1a)和1b型(PTTSu V 1b)核酸均无阳性信号扩增,可重复性好,组内变异系数为0.39%~1.69%,组间变异系数0.69%~2.19%。本方法的建立可用于定量分析PTTSu Vk2感染噬性组织器官和感染程度,为PTTSu Vk2的流行病学研究及临床诊断等提供了一种可靠的方法。

分类号： S852.651

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