胸膜肺炎放线杆菌4型菌毛亚单位基因apfA特异性片段的克隆和表达

文献类型: 中文期刊

第一作者: 郭洋

作者: 郭洋;刘思国;王春来;张秀华;彭永刚;宫强;杜绍范

作者机构:

关键词: 猪胸膜肺炎放线杆菌;菌毛;apfA;克隆;表达

期刊名称: 中国兽医学报

ISSN: 1005-4545

年卷期: 2006 年 26 卷 05 期

页码: 498-500

收录情况: 北大核心 ; CSCD

摘要: 以猪胸膜肺炎放线杆菌血清型7型国内分离株25-4株基因组DNA为模板,PCR扩增其apfA特异性基因片段,PCR产物经纯化后与载体pMD18-T进行连接、转化,经酶切及序列分析鉴定后,亚克隆至原核表达载体pGEX-6P-1中,构建重组表达质粒pGEX-apfA,转化到感受态大肠杆菌DE3中,以IPTG进行诱导,进行SDS-PAGE电泳。结果表明,25-4株apfA基因与基因库中标准7型apfA基因的同源性达到98%,所表达的融合蛋白相对分子质量约为42 000,与预测值相符。apfA特异性基因片段的成功克隆和表达为猪胸膜肺炎放线杆菌病致病机理的研究及新型疫苗的研制打下了基础。

分类号: S852.4`Q78

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