香菇微卫星标记变性聚丙烯酰胺凝胶电泳的应用及正交优化

文献类型： 中文期刊

第一作者： 张丹

作者： 张丹;颜梦秋;张美彦;谭琦;宋春艳;尚晓冬

作者机构：

关键词： 香菇;变性聚丙烯酰胺凝胶电泳;微卫星标记;正交试验设计;银染试验

期刊名称： 江苏农业科学

ISSN： 1002-1302

年卷期： 2021 年 005 期

页码： 57-61

收录情况： 北大核心

摘要： 变性聚丙烯酰胺凝胶电泳是一种高效鉴定微卫星分子标记的方法,广泛应用于种质鉴定、遗传连锁图谱构建及分子标记辅助育种等研究中。该方法由于操作繁琐,目前在食用菌领域的应用尚不广泛。以香菇为研究对象,建立变性聚丙烯酰胺凝胶电泳的检测流程,并利用正交试验对检测流程中涉及的加样缓冲液与PCR反应液的体积比、95℃变性时间、置于冰上冷却时间、银染时间、银染后胶板去离子水洗时间等5个操作节点进行优化。结果表明,加样缓冲液与PCR反应液体积比为1∶2,95℃变性2～5 min,置于冰上冷却15～20 min,银染7 min,银染后胶板用去离子水洗5～10 s是正交试验的较优处理组合。试验建立了香菇微卫星标记变性聚丙烯酰胺凝胶电泳检测操作规程,该操作规程具有成本低、效率高、易批量化操作等优点,对其他食用菌微卫星标记的应用具有重要的参考价值。

分类号： S646.12

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