一种适用于油菜、大豆、花生、芝麻四种油料作物种子的RNA提取方法

文献类型： 中文期刊

第一作者： 孙海波

作者： 孙海波;王智慧;刘学群;黄军艳;董彩华;刘胜毅

作者机构：

关键词： RNA提取;油料作物;种子;荧光定量;油菜;大豆;花生;芝麻

期刊名称： 中国油料作物学报

ISSN： 1007-9084

年卷期： 2012 年 34 卷 04 期

页码： 353-358

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 油料作物种子中,大量油脂、蛋白、酚类物质的存在和易氧化的特点导致RNA提取困难。为了解决这一问题,本研究在商业化RNA提取试剂盒的基础上,通过以下3方面的改进,使之成功应用于油菜、花生、芝麻和大豆的各个时期种子RNA提取和后期的荧光定量分析实验:1)增加抗氧化剂巯基乙醇和PVP;2)根据不同作物的油脂含量调整氯仿的比例;3)改进RNA沉淀方法,加大洗脱液体积后用乙醇沉淀。与常规的CTAB、TRIZOL及文献报道的RNA提取方法比较,本方法提取的RNA更完整、得率更高、纯度更高;所得RNA被成功应用于FAD2基因的荧光定量表达分析,发现了四种作物种子不同发育时期的FAD2基因的表达差异,证明了改良方法的有效性。

分类号： S565

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