应用CRISPR/Cas9技术对五指山猪GHRHR基因的编辑

文献类型： 中文期刊

第一作者： 王文涛

作者： 王文涛;张思佳;何鑫淼;陈诗怡;吴赛辉;张冬杰;陈瑶生;丛佩清;亓美玉;田明;刘娣;何祖勇

作者机构：

关键词： 五指山猪;生长激素释放激素受体;基因编辑猪;CRISPR/Cas9

期刊名称： 东北农业大学学报

ISSN： 1005-9369

年卷期： 2025 年 56 卷 002 期

页码： 44-52

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 生长激素释放激素受体（GHRHR）表达于垂体细胞表面，调节垂体生长激素合成与分泌，对动物生长发育发挥重要调控作用。为深入了解GHRHR对五指山猪生长发育的影响，通过CRISPR-ctRNP体外酶切试验，筛选出切割效率达27.3%的1条gRNA用于构建CRISPR/Cas9表达载体。转染五指山猪肾细胞后，经流式分选富集到编辑效率高达100%的细胞群体作为供体细胞，进行体细胞核移植；再将250枚克隆胚胎转移至5头代孕母猪输卵管中，最终1头代孕母猪成功妊娠，分娩3头克隆仔猪均为GHRHR双等位基因编辑个体；编辑均导致GHRHR基因产生移码突变，可导致蛋白翻译提前终止，丧失生物学功能。最终仅有1头GHRHR编辑五指山猪存活，该个体60日龄时，体质量较野生型个体平均体质量下降23.4%。研究结果在五指山猪中实现GHRHR基因高效编辑，为培养微型宠物猪及解析GHRHR的调控功能提供理论依据。

分类号： S828

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