猪繁殖与呼吸综合征病毒N蛋白基因的克隆及表达

文献类型： 中文期刊

第一作者： 刘斌

作者： 刘斌;才学鹏;郭爱疆;贾万忠;骆学农;陈晓宇;刘振勇;丁军涛;刘英

作者机构：

关键词： 猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV);N基因;克隆与表达

期刊名称： 甘肃农业大学学报

ISSN： 1003-4315

年卷期： 2009 年 44 卷 01 期

页码： 33-37

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 根据猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)核酸序列设计引物,用RT-PCR扩增出PRRSV甘肃株的核衣壳蛋白(N)基因,将N基因克隆至pGEM-T easy载体上,获得含N基因的阳性重组质粒pGEM-T easy-N.对质粒中的插入片段进行测序,应用DNAStar分析所测序列与GenBank中已登录的PRRSV毒株的同源性,再将其亚克隆至原核表达载体pGEX-4T-1中,得到重组表达载体pGEX-4T-1-N,转化E.coliBL21(DE3)细胞,用SDS-PAGE检测表达产物,并对其进行纯化.结果表明:PRRSV甘肃株N基因核甘酸序列与PRRSV-VR2332株的同源性为93.3%,与欧洲LV株的同源性为66.1%;构建的重组表达载体在大肠杆菌中获得了成功表达,表达产物为40ku的可溶性融合蛋白.

分类号： S852.65

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