靶向B细胞的口蹄疫GHloop多肽抗原的制备及免疫效力鉴定

文献类型： 中文期刊

第一作者： 侯立婷

作者： 侯立婷;张媛媛;于晓明;杜露平;张元鹏;程海卫;乔绪稳;李丁;郑其升;陈瑾

作者机构：

关键词： GHloop-DD;体液免疫;B细胞;长寿浆细胞

期刊名称： 中国动物传染病学报

ISSN： 1674-6422

年卷期： 2023 年 31 卷 003 期

页码： 74-81

收录情况： 北大核心

摘要： 本研究将葡萄球菌A蛋白人工合成类似物的二聚体(DD)与口蹄疫的GHloop串联,按照大肠杆菌偏好性密码子优化合成GHloop-DD,并评价其免疫原性.将GHloop-DD插入到原核表达载体pET-32a中,鉴定阳性后转入E.coli BL21进行诱导表达.利用SDS-PAGE与Western blot对目的基因表达产物的可溶性进行分析.利用镍亲和层析柱纯化目的蛋白;利用BCA试剂盒测定重组蛋白的浓度,将重组蛋白(2.5 μg/只)与206佐剂乳化,制备疫苗,免疫5周龄小鼠,同时设商品化合成肽苗对照与空白对照.免疫后28 d采集试验小鼠血清,利用口蹄疫病毒多肽ELISA抗体检测试剂盒检测免疫小鼠血清的抗体水平;利用流式细胞仪测定淋巴结B细胞的数量及骨髓中长寿浆细胞的数量;利用荧光定量检测相关趋化因子的表达水平;利用细胞因子检测试剂盒检测脾脏淋巴细胞刺激后上清液中的细胞因子的水平.SDS-PAGE结果表明,GHloop-DD基因在大肠杆菌中以可溶形式获得高水平表达;Western blot结果显示,表达的重组蛋白能够与特异性抗体发生反应.免疫试验结果表明,GHloop-DD不但能够刺激免疫小鼠产生高水平的多肽特异性ELISA抗体,而且能够提高淋巴结B细胞的数目及相关趋化因子水平,使骨髓中长寿浆细胞的数量和脾脏淋巴细胞刺激后上清液中细胞因子的水平显著提高.以上结果表明,本研究制备的GHloop-DD具有良好的免疫原性,为口蹄疫多肽疫苗的研制提供了新的方向.

分类号： S852.4

  • 相关文献

[1]金针菇子实体多糖FVPB1对小鼠B细胞的免疫调节作用. 王慧敏,张劲松,冯婷,包海鹰,余养朝,冯占,贾薇,汪雯翰. 2021

[2]B细胞抗原受体信号转导途径研究进展. 代鹏,马军武,杨双. 2011

[3]B细胞表位预测方法研究进展. 梁瑾,王靖飞. 2009

[4]猪免疫口蹄疫灭活疫苗后外周血细胞亚群变化的研究. 张柳,冯霞,靳野,祁淑芸,张晓霞,马军武. 2016

[5]B细胞永生化方法的研究进展. 王省,李坤,卢曾军,汪肖肖,谯雨,刘在新,曹轶梅. 2018

[6]番鸭呼肠孤病毒感染对禽流感疫苗免疫抗体应答的影响. 林锋强,朱小丽,陈仕龙,肖世峰,程晓霞,王劭,陈少莺. 2018

[7]犬Ⅰ型腺病毒Ⅸ蛋白的生物信息学分析. 王鹏,廉士珍,刘晓颖,胡博,邓效禹,张蕾,吕爽,王洪海,闫喜军,朱言柱. 2021

[8]番鸭呼肠孤病毒感染对MPV-GPV弱毒疫苗抗体应答的影响. 林锋强,朱小丽,陈仕龙,肖世峰,程晓霞,王劭,陈少莺. 2018

[9]氟对免疫功能的影响. 张广和,李辉,韩天龙,王敏. 2013

[10]A型口蹄疫合成肽疫苗的免疫效力评价. 唐华,刘新生,方玉珍,蒋守田,潘丽,吕建亮,张中旺,周鹏,张永光,王永录. 2013

[11]牛病毒性腹泻病毒持续感染的免疫学研究进展. 钟发刚,王新华,程安春. 2006

[12]日粮苏氨酸水平对蛋鸡免疫机能的影响. 聂伟,杨鹰,王忠,郭军,李晓东. 2011

[13]鸡败血支原体接种鸡体液免疫的变化规律. 于圣青,丁铲,刘晓文,姜平,戴亚斌,王晓泉. 2000

[14]灵芝多糖提取物对鸡免疫水平的影响. 王小琼,张志军,李淑芳,魏雪生,陈晓明. 2011

[15]昆虫天然免疫相关基因研究进展. 刘小民,袁明龙. 2018

[16]重组禽流感疫苗株rH5N3的生物学特性与免疫效果. 童俊容,刘明,刘春志,童光志,陈政良. 2006

[17]牛支原体诱导宿主免疫应答的研究进展. 季文恒,陈胜利,郝华芳,颜新敏,吴娅琴,翟肖辉,Hussam Askar Hamad,马丽娜,储岳峰. 2020

[18]鸡传染性法氏囊病中等毒力活疫苗对H9亚型禽流感灭活疫苗体液免疫应答影响的研究. 杨恒东,刘学贤,高崧. 2009

[19]噬菌体治疗中的免疫问题探讨. 王冉,张莉莉,何涛,庞茂达,周艳. 2019

[20]不同佐剂对病毒灭活疫苗免疫效果的影响. 时小光,李秀丽,张闯年,黄平升,张建华,王伟伟,鄢明华. 2020

作者其他论文 更多>>

微信小程序