文献类型: 中文期刊
第一作者: 董娜
作者: 董娜;张增艳;辛志勇
作者机构:
关键词: ERF(ethylene-responsive factor);TaERF1b;原核蛋白表达;包涵体
期刊名称: 植物遗传资源学报
ISSN: 1672-1810
年卷期: 2008 年 9 卷 03 期
页码: 283-287
收录情况: 北大核心 ; CSCD
摘要: 为了得到纯化的TaERF1b活性蛋白,将TaERF1 b基因含有AP2/ERF结构域的片段插入原核表达载体pGEX-4T-1的多克隆位点中,构建GST-TaERF1b融合蛋白表达载体,并转化到大肠杆菌BL21(DE3)中。0.1mmol/L IPTG即能诱导融合蛋白表达,37℃诱导4h或30℃诱导8h,融合蛋白均以包涵体的形式表达,16℃诱导12h,融合蛋白不表达。包涵体经溶解及稀释复性后,过GST亲和层析柱,获得纯化的融合蛋白,考马斯亮蓝法测得纯化蛋白的浓度约为0.5μg/μl,凝胶阻滞实验表明包涵体复性成功,所得蛋白具有生物活性。
分类号: S435.121
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