串联表达猪繁殖与呼吸综合征病毒GP5表位蛋白间接ELISA方法的建立

文献类型： 中文期刊

第一作者： 陈如敬

作者： 陈如敬;吴学敏;车勇良;王隆柏;刘玉涛;严山;魏宏;庄向生;周伦江

作者机构：

关键词： 猪繁殖与呼吸综合征病毒;重组GP5表位蛋白;间接ELISA

期刊名称： 中国畜牧兽医

ISSN： 1671-7236

年卷期： 2014 年 41 卷 04 期

页码： 43-47

收录情况： 北大核心

摘要： 利用猪繁殖与呼吸综合征病毒(porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV)GP5抗原表位串联表达重组蛋白作为包被抗原,建立检测PPRSV抗体的间接ELISA方法。重组蛋白最佳包被浓度为7.5μg/mL,最佳封闭液为5%脱脂奶粉,37℃封闭2h;血清最适稀释度为1∶100,37℃作用2h;兔抗猪IgG/辣根酶(HRP)(1∶3000),37℃作用2h;37℃避光显色15min读取D450nm值。结果经统计学分析得出,S/P值≥0.254为阳性,S/P值≤0.212为阴性。所建立的ELISA方法检测其他5种猪常见病原阳性血清,其D450nm值均小于0.212。利用建立的ELISA方法对临床免疫勃林格殷格翰猪繁殖与呼吸综合征活疫苗4周后的猪血清70份进行检测,其D450nm值均大于0.85,表明本研究建立的重组GP5表位蛋白间接ELISA方法可用于临床样品的监测。

分类号： S858.28

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