新型耐热β-1,4-木糖苷酶的重组表达及酶学性质

文献类型： 中文期刊

第一作者： 黄颖

作者： 黄颖;姚雪妍;刘腾飞;米硕甫;孙丽超;辛凤姣

作者机构：

关键词： 热解纤维素果汁杆菌属;极端耐热;β-木糖苷酶;重组表达;酶学性质

期刊名称： 微生物学报

ISSN： 0001-6209

年卷期： 2019 年 04 期

页码： 689-699

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 【目的】拟对来源于热解纤维素果汁杆菌的新型β-木糖苷酶基因(CoXyl B)进行重组表达和酶学性质研究。【方法】在大肠杆菌系统中成功表达CoXyl B基因,并通过镍柱亲和层析、强阴离子交换和凝胶层析等纯化方法获得纯酶。【结果】对CoXyl B酶学性质的研究结果显示,在以4-对硝基苯酚-β-D-木糖苷为底物时,该酶的最适反应温度为90℃,最适反应pH为6.0。在40–70℃范围内CoXyl B酶活较高且比较稳定。在pH 5.0–6.0之间,70℃孵育1 h后,CoXyl B的相对酶活仍保留80%以上。Ag~+、高浓度的SDS和PMSF对酶活力的抑制作用较显著,而高浓度Mg~(2+)、Li~+和EDTA对酶活力的激活作用较为明显。CoXyl B的k_(cat)和K_m值分别为5.0×10~(–3)s~(–1)和1.9 mmol/L。薄层层析色谱显示CoXyl B具有降解木二糖、木三糖和木四糖的能力。【结论】本研究鉴定出CoXyl B为一种新型的极端耐热木糖苷酶,CoXyl B的酶学性质研究将为其在食品热加工以及生物降解领域中的应用提供参考。

分类号： Q55

  • 相关文献

[1]定向引入N-糖基化位点促进芳基醇氧化酶热稳定性及底物亲和力. 曹查,朱作华,龚文兵,周映君,谢纯良,彭源德. 2024

[2]红球菌来源QsdA型N-酰基高丝氨酸内酯酶水产养殖饲用潜力分析. 张美超,杨雅麟,宋水山,徐俐,姚斌,周志刚. 2015

[3]草菇β-木糖苷酶活性及其编码基因xyl的转录表达研究. 王孟兰,赵妍,黄建春,陈明杰. 2014

[4]不同果肉厚度苦瓜β-木糖苷酶基因McXYLs表达差异分析. 裘波音,林珲,张前荣,陈敏氡,林锦辉,温庆放,朱海生,李大忠. 2025

[5]大黄鱼β_2-微球蛋白基因的克隆及其在大肠杆菌中的重组表达. 余素红,王玉桥,陈新华. 2009

[6]厌氧梭菌表达载体在大肠杆菌中的直接表达及活性筛选. 陈燕,黄金群,裴建新,庞浩. 2013

[7]蚯蚓纤溶酶基因P_(239)的原核表达、纯化及活性测定. 陈飞,孟宪志,李莉,单风平,吴红艳,桓明辉,陈杰. 2004

[8]蚯蚓溶栓酶基因的克隆及非融合性表达. 陈飞,李莉,孟宪志,梁国栋,刘艳玲,吴红艳. 2003

[9]禽分枝杆菌副结核亚种map0862基因与map2154c基因的串联重组表达. 迟磊,刘思国,王春来,宫强,赵昆,刘建东,王勇,云孟克,刘慧芳,赵福广. 2008

[10]禽流感病毒HA基因在S2细胞中的表达与鉴定. 史利军,张亚兰,尹惠琼,章金刚,李刚. 2010

[11]木聚糖酶XynB-E18的重组表达纯化及酶学性质测定. 宋迎,鲁芳,严孝金,张蓓,刘永,张立,孟昆,杨培龙,姚斌,高伟. 2018

[12]猪源嗜性衣原体HB1043株主要外膜蛋白(MOMP)基因的分析及重组表达. 闫少侠,田永祥,刘泽文,袁芳艳,郭锐,段正赢,杨克礼,孟丽,周丹娜. 2013

[13]谷氨酸棒杆菌麦芽寡糖基海藻糖水解酶基因的克隆与表达. 常敏,乔宇,丁宏标. 2011

[14]牛抗菌肽Bac7-Bac5融合基因在大肠杆菌中的过表达,纯化及抑菌活性. 赵昆,刘思国,王春来,宫强,迟磊,刘建东,王勇,云孟克,常月红,刘慧芳,周媛媛,孙延鸣. 2007

[15]亚洲璃眼蜱免疫抑制蛋白P36的分子鉴定及重组表达. 郭凤璕,狄清,周勇志,曹杰,张厚双,周金林. 2010

[16]噬菌体裂解酶Lysep3的毕赤酵母重组表达和活性分析. 闫伟,杨娜,毛若雨,王秀敏,郝娅,马炫炫,滕达,王建华. 2020

[17]抗菌肽CAP18在大肠杆菌中表达、纯化及活性的初步鉴定. 徐灵龙,石星明,王云峰,史春林,王玫,孙妍,童光志. 2008

[18]烟草C3HC4型锌指蛋白的原核表达及转基因植株功能研究. 杨秀芬,刘勇,邱德文. 2014

[19]毕赤酵母Kar2p过表达对假黑盘菌素表达量的影响. 王楠,李刚强,郭文芳,刘德虎. 2016

[20]副结核分枝杆菌MAP1588C蛋白的原核表达与抗原性分析. 刘银冰,陈利苹,鄢秋龙,曹俊,刘思国. 2012

作者其他论文 更多>>

微信小程序