适用于棉花荧光原位杂交的DNA纤维高效制备技术

文献类型： 中文期刊

第一作者： 彭仁海

作者： 彭仁海;宋国立;刘方;黎绍惠;王春英;张香娣;王玉红;王坤波

作者机构：

关键词： 棉花;荧光原位杂交;DNA纤维;高效制备

期刊名称： 作物学报

ISSN： 0496-3490

年卷期： 2009 年 35 卷 03 期

页码： 412-417

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 棉花富含酚类和多糖等高分子次生化合物,细胞质浓厚,且染色体形态小、数目多、制片困难,至今还未见棉花DNA纤维制备方面的报道。本研究用"刀切引流法",在含有Triton X-100和PVP40的冰冷细胞核提取缓冲液中,用锋利的刀片切割发育一周的棉花黄化子叶以释放棉花细胞核,所得细胞核干净完整杂质少,不需要研磨和巯基乙醇等处理,方便快捷无毒害,成功率达到100%。细胞核在室温下经温和碱裂解去除染色质上的蛋白质后,以前端导引裂解液铺展载玻片,即"引流法"拉伸制备DNA纤维,避免了液体表面张力的影响,消除了因载玻片推抹用力不均而导致的DNA纤维堆积和断裂,所制备的DNA纤维平直完整、伸展程度均匀、背景清晰。用基因组和45S rDNA分别标记探针进行杂交,结果表明所制备的棉花DNA纤维适用于荧光原位杂交。本研究探索出一套简单、高效、快捷、无毒害的适宜于棉花荧光原位杂交的DNA纤维制备技术,必将为棉花基因组研究和全基因组序列的最终完成提供强有力的技术支持。

分类号： S562

  • 相关文献

[1]棉花原位杂交研究进展. 吴琼,孙长君,李书涛. 2009

[2]棉花GISH-NOR的初步探讨. 刘三宏,王坤波,宋国立,王春英,刘方,黎绍惠,张香娣,王玉红. 2005

[3]棉花体细胞染色体rDNA-FISH技术. 王春英,王坤波,宋国立,李懋学,别墅,黎绍惠,张香娣. 2001

[4]海岛棉A亚组和草棉及阿非利加棉单染色体鉴定. 程华,甘仪梅,刘方,蔡小彦,王春英,王玉红,王坤波. 2013

[5]二倍体栽培棉45SrDNA-FISH作图及核型比较. 别墅,王坤波,王春英,宋国立,孔繁玲,刘方,刘三宏,黎绍惠,张香娣,王玉红. 2004

[6]棉花Oligo-FISH技术建立及其初步应用. 刘玉玲,刘震,李兆国,王玉红,周忠丽,蔡小彦,王星星,王小艳,张树林,赵海燕,张振梅,王坤波,刘方,彭仁海. 2017

[7]逐步添加法制备单链环状DNA的影响因素探究. 樊一乔,安然,李琦,李敬,梁兴国. 2019

[8]小麦-鹅观草易位系T7A/1Rk#1的选育与鉴定. 别同德,冯祎高,徐川梅,陈佩度. 2009

[9]玉米和类玉米杂交后代异染色质纽重复序列的遗传稳定性. 覃兰秋,谢莉,周锦国,谭贤杰,江禹奉,谢和霞,谢小东,程伟东. 2013

[10]植物rRNA基因组织模式的荧光原位杂交比较分析. 蒋向辉,宋运淳. 2012

[11]植物染色体分带及其荧光原位杂交技术研究进展. 高猛,安玉麟,孙瑞芬. 2010

[12]rDNA序列在多种蔬果类植物染色体上的定位. 牛凯,陈成彬,刘慧静,古瑜,王春国,孙德岭,宋文芹. 2017

[13]巴西橡胶树胶乳转化酶HbNIN基因家族物理定位的研究. 高佳佳,王英,高和琼,朱稳,庄南生. 2014

[14]木薯中性/碱性转化酶基因家族11个成员在染色体上的定位. 朱利广,刘平平,欧祥梅,王英,高和琼,庄南生. 2017

[15]芸薹属B基因组异附加系材料高效鉴定体系的创建. 谭晨,朱开元,向依,李再云. 2018

[16]烟粉虱MEAM 1隐种主要内共生菌的定位和分布. 陈吉强,张毅波,张桂芬,万方浩,刘怀. 2020

[17]栽培玉米亚种5 SrDNA NTS序列分析及FISH定位方法比较. 马卉,朱苏文,程备久. 2010

[18]橡胶素基因家族4个成员在橡胶树染色体上的定位. 彭宝丰,王英,高和琼,庄南生. 2016

[19]巴西橡胶树热研7-33-97品种45S rDNA的FISH分析及定位. 唐冰霞,王英,高和琼,庄南生. 2015

[20]巴西橡胶树染色体制片方法的改良及FISH信号检测. 张志丹,王英,庄南生,高和琼. 2019

作者其他论文 更多>>

微信小程序