猪轮状病毒OSU强毒株VP7基因的克隆及其抗原表位原核表达和免疫学活性分析

文献类型： 中文期刊

第一作者： 时洪艳

作者： 时洪艳;冯力;陈建飞;孙东波;吴波平

作者机构：

关键词： 猪轮状病毒;VP7基因;克隆;原核表达

期刊名称： 中国畜牧兽医学会畜牧兽医生物技术学分会暨中国免疫学会兽医免疫分会第七次研讨会论文集

ISSN：

年卷期： 2008 年

页码： 4

收录情况： CSCD

摘要： 参照GenBank中所收录的猪轮状病毒OSU株序列设计了一对特异性引物,RT-PCR扩增出1062bp的VP7全长基因,与参考OSU序列的核苷酸同源性达99.8%,克隆到pMD18-T载体中,获得pMD18-T-VP7阳性质粒。以阳性质粒为模板,利用引入BamHⅠ和XhoⅠ酶切位点的表达引物进行PCR扩增得到含有VP7中和抗原表位区域639bp的基因片段,定向克隆到表达载体pGEX-6P-1中,经酶切PCR鉴定的阳性质粒转化大肠杆菌BL21(DE3),经IPTG(终浓度为1.0mmol/mL)37℃诱导4h后,SDS-PAGE电泳显示表达了大小约50ku带GST标签的融合蛋白,薄层扫描显示表达...

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