甲型鸭肝炎病毒2A蛋白的原核表达、纯化及多克隆抗体的制备

文献类型： 中文期刊

第一作者： 胡文

作者： 胡文;孟春春;李传峰;陈宗艳;梁瑞英;李宁;黄云秀;吴润;刘光清

作者机构：

关键词： 甲型鸭肝炎病毒;2A蛋白;原核表达;蛋白纯化;多克隆抗体

期刊名称： 甘肃农业大学学报

ISSN： 1003-4315

年卷期： 2014 年 06 期

页码： 5-9

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 采用RT-PCR方法从甲型鸭肝炎病毒ZJ-V株的RNA模板中扩增出2A基因,将其克隆到表达载体pET-30(+)中,经酶切和测序鉴定后转化表达宿主菌BL21(DE3)细胞中,以IPTG诱导表达His-DHAV-2A融合蛋白.结果表明:目的蛋白在1mmol/L IPTG诱导4h的情况下以可溶性形式表达.表达产物经Ni柱纯化后获得了高纯度的融合蛋白.以纯化后的His-DHAV-2A融合蛋白为抗原免疫白兔制备多抗,Western-blot试验表明制备的多抗可与目的蛋白发生特异性反应.以上结果说明,DHAV的2A蛋白在大肠杆菌中成功表达,且制备的多抗血清可用于2A蛋白的表达检测.

分类号： S852.65

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