牛α-IFN及FMDV P12A3C双表达载体的构建及其在BHK-21细胞中的表达

文献类型： 中文期刊

第一作者： 杨彬

作者： 杨彬;兰喜;李宝玉;殷相平;李学瑞;柳纪省

作者机构：

关键词： 口蹄疫病毒;P12A基因;3C基因;α-干扰素;pBudCE4.1载体

期刊名称： 生物技术通报

ISSN： 1002-5464

年卷期： 2012 年 0 卷 02 期

页码： 80-84

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 从口蹄疫病毒Asia I/Jiangsu毒株的细胞毒中提取总RNA,通过RT-PCR方法分别获得FMDV的P12A及3C基因;同时以pMD18-T-α-IFN质粒为模板,PCR扩增得到α-IFN基因。将α-IFN基因及FMDV P12A及3C基因连接至双启动子表达载体pBudCE4.1上,构建成双效表达质粒pBudCE4.1-α-IFN-P12A3C,经电泳、PCR、双酶切和DNA测序鉴定表明双效质粒载体构建成功。用此重组质粒转染BHK-21细胞后并对其表达情况进行检测,表明该双表达质粒在BHK-21细胞中能够成功表达。以此重组质粒免疫乳鼠后12 h,按100 TCID50/0.1 mL的量进行攻毒,结果发现该质粒能够抑制病毒的增殖,对乳鼠有一定的保护作用。结果表明成功构建了牛α-IFN及FMDV P12A3C组合基因双表达载体,为进一步研究口蹄疫基因疫苗提供前期基础。

分类号： S855.3

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