猪圆环病毒2型LAMP可视化快速检测方法的研究

文献类型： 中文期刊

第一作者： 胡瑞丽

作者： 胡瑞丽;倪建平;赵笑;赵庆;史斌;赵桓震;赵斌安;赵凯

作者机构：

关键词： 猪圆环病毒2型;环介导等温扩增;检测;诊断试剂盒

期刊名称： 上海农业学报

ISSN： 1000-3924

年卷期： 2016 年 32 卷 01 期

页码： 23-28

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 本研究旨在建立有效的针对猪圆环病毒2型(PCV2)的诊断技术及开发试剂盒。采用环介导等温扩增方法(LAMP)检测猪圆环病毒2型(PCV2),对PCV2的ORF2基因设计出3对特异性引物,扩增PCV2基因的最佳温度和时间优化到59℃孵育55 min。用该方法对临床样品进行检测,LAMP检测对PCV2的检测限为10拷贝/μL,而常规PCR检测法的检测限为1 000拷贝/μL,表明LAMP检测法灵敏度高。该检测法不会与猪圆环病毒Ⅰ型、猪繁殖与呼吸综合征病毒、猪流行性腹泻病毒、传染性胃肠炎的猪病毒和轮状病毒发生交叉反应。用建立起的LAMP检测法对1 100个临床样品进行检测,950个样品被检测出为阳性样品。稳定性试验表明该试剂盒可以耐受至少40次的反复冻融。结果显示,该方法建立的猪圆环病毒2型诊断方法灵敏度高,特异性强,稳定性好。

分类号： S852.65

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