表达马尔堡病毒囊膜糖蛋白重组水泡性口炎病毒的构建

文献类型: 中文期刊

第一作者: 梁博

作者: 梁博;王申;王琪;王玮琦;贺文文;李政蓉;冯娜;赵永坤;王铁成;闫飞虎;杨松涛;夏咸柱

作者机构:

关键词: 马尔堡病毒;水泡性口炎病毒;假型病毒

期刊名称: 中国兽医科学

ISSN: 1673-4696

年卷期: 2022 年 011 期

页码: 1397-1404

收录情况: 北大核心 ; CSCD

摘要: 为了构建携带e GFP标签并表达马尔堡病毒(Marburg virus,MARV)囊膜糖蛋白(GP)的复制型水泡性口炎病毒(Vesicular stomatitis v,iVrSuVs)假型病毒,通过将VSV感染性克隆全长质粒中的G基因替换成马尔堡病毒的GP基因,与4个辅助质粒p3.1-VSV-N、p3.1-VSV-P、p3.1-VSV-L、p3.1-VSV-G共转染BSR细胞,拯救成功的重组VSV病毒传5代后,进行Western-blot、间接免疫荧光试验、RT-PCR鉴定和生长动力学曲线检测。显微镜检测结果显示,3个重组全长质粒分别与4个辅助质粒共转染BSR细胞培养48 h后均能使细胞发生合胞体病变并伴有绿色荧光蛋白表达;Western-blot、间接免疫荧光试验鉴定结果显示,3株马尔堡病毒的囊膜糖蛋白在重组VSV病毒中正确表达;生长动力学曲线显示,3株重组VSV病毒的毒力相较于母本VSV病毒均降低,但病毒滴度依旧能达到1×10~6~1×10~7TCID50mL-1。结论:本研究成功构建3株携带e GFP标签表达MARV GP的复制型VSV假型病毒,为后续MARV疫苗与抗体的效果评价等奠定了基础。

分类号: S852.65

  • 相关文献

[1]埃博拉和马尔堡病毒囊膜糖蛋白嵌合型重组水泡性口炎病毒的构建及鉴定. 邵钰,王金良,刘任强,张会雷,王喜军,葛金英,温志远,步志高. 2016

[2]稳定表达T7RNA聚合酶IBRS-2细胞系的建立以及利用该细胞系对SVDV的体内拯救. 郑海学,田宏,靳野,吴锦艳,尚佑军,刘湘涛,谢庆阁. 2008

[3]表达马尔堡病毒囊膜糖蛋白GP重组新城疫病毒的构建及免疫原性评估. 胡旭乐,温志远,宋坤,王喜军,陈伟业,葛金英,步志高. 2014

[4]马尔堡病毒核蛋白的原核表达及纯化. 王皓婷,王水明,史子学,邵东华,魏建超,刘学辉,王志亮,王雪敏,马志永. 2011

[5]EBOV-Z和MARV的NP基因在杆状病毒表达系统的表达及反应原性鉴定. 王宗尧,史子学,刘阳,朱紫祥,吴德峰,王水明,刘学辉,马志永. 2012

[6]水泡性口炎病毒印第安纳株反基因操作系统的建立. 温志远,葛金英,王永,胡森,郝永清,步志高. 2006

[7]表达水泡性口炎病毒G蛋白的重组腺病毒的构建与鉴定. 薛晓娟,金红岩,隋修锟,李文超,李刚. 2015

[8]莱斯顿型埃博拉病毒GP蛋白嵌合型水泡性口炎病毒的构建与免疫原性研究. 祖述龙,宋继军,邵钰,刘任强,温志远,周微微,王雪莲,葛金英,步志高. 2016

[9]5种人兽共患病病毒多重RT-PCR检测方法的初步建立. 孙庆歌,杨银辉,张维军,王群,康晓平,李永强,白宇,童铁钢,杨涛,步志高,吴东来. 2009

作者其他论文 更多>>