高粱可溶性酸性转化酶基因(SAI-1)PCR克隆方法

文献类型： 中文期刊

第一作者： 钟海丽

作者： 钟海丽;聂元冬;王智;顿宝庆;李桂英

作者机构：

关键词： 高粱;可溶性酸性转化酶;PCR克隆方法

期刊名称： 植物遗传资源学报

ISSN：

年卷期： 2015 年 01 期

页码： 177-182+188

收录情况： CSCD

摘要： 可溶性酸性转化酶(SAI)是蔗糖代谢途径中的关键酶,对植物生长发育起着至关重要的调节作用,研究简捷快速克隆可溶性酸性转化酶基因方法,对于育种材料和品种资源的基因分型具有重要意义。本研究通过已知的高粱可溶性酸性转化酶基因序列及高粱基因组中该基因序列片段,设计引物,比较了分段克隆、基因全长克隆、巢式PCR克隆等方法克隆高粱SAI-1基因的效果,结果表明,直接扩增全长,扩增产物极其不稳定且扩增产物纯化、连接,转化后得不到阳性克隆;采用均等分段克隆,前半段扩增产物纯化、连接转化后得不到阳性克隆,但后半段克隆成功;针对高粱基因组信息中SAI-1基因上游的未知序列部分设计引物,进行单独克隆(635bp)...

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